化工仪器网
详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
实验室分离的兔甲状腺滤泡上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔甲状腺滤泡上皮经TG(甲状腺球蛋白)免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 兔甲状腺滤泡上皮原代细胞 | 组织来源 | 甲状腺 |
英文名称 | Rabbit Thyroid Follicular Epithelial Cells | 货号 | YS-01X8373 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
兔甲状腺滤泡上皮细胞分离自甲状腺组织；甲状腺是脊椎动物非常重要的腺体，属于内分泌器官。在哺乳动物身体中，它位于颈部甲状软骨下方，气管两旁。甲状腺表面有结缔组织被膜，表面结缔组织深入到腺实质，将实质分为许多不明显的小叶，小叶内有很多甲状腺滤泡和滤泡旁细胞。甲状腺控制使用能量的速度、制造蛋白质、调节机体对其他贺尔蒙的敏感性。甲状腺依靠制造甲状腺素来调整这些反应，有T3和T4。这两者调控代谢、生长速率还有调解其他的身体系统。T3和T4由碘和酪胺酸合成。甲状腺也生产降钙素，调节体内钙的平衡。其中，甲状腺滤泡上皮细胞（也称为滤泡细胞或主要细胞）是在甲状腺细胞是负责生产和分泌甲状腺激素，甲状腺素（T4）和三碘甲状腺原（T3）。
培养信息：
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：上皮细胞样
传代特性：可传1-2代
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔甲状腺滤泡上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
小鼠脑瘤细胞;BC3H1 | FAM134C蛋白抗体 |
G蛋白偶联受体12抗体 | 酸化有丝分裂激酶B/C抗体 |
肺α/β水解酶蛋白1抗体 | 纤维母细胞表面蛋白抗体 |
膜粘连蛋白7抗体 | FAM134C蛋白抗体 |
纤维母细胞表面蛋白抗体 | 酸化有丝分裂激酶B/C抗体 |
人小胶质细胞(HM) ( 5×105 ) | Promocell C-28050 DC Generation Medium, 树突状细胞生成培养基(即用型) 250ml |
人骨髓间充质干细胞(hMSCs) | TNFRSF12A Others Human 人 TNFRSF12A / FN14 / TWEAKR 人细胞裂解液 (阳性对照) |
CLEC6A Others Mouse 小鼠 CLEC4N 人细胞裂解液 (阳性对照) | TFRC Others Cynomolgus 食蟹猴 ansferrin Receptor / TFRC / CD71 人细胞裂解液 (阳性对照) |
人心室成纤维细胞 (HCFav)( 5×105 ) 293A，人胚肾上皮细胞系(腺病毒包装级别) Human | 貂源细胞 淋巴细胞白血病细胞，A3细胞 3T3-swiss albino细胞，小鼠胚胎成纤维细胞 |
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1008 | 兔甲状腺滤泡上皮原代细胞纤维母细胞表面蛋白抗体 |
猕猴肌肉细胞;MMm7 人结肠癌细胞，HT-29细胞 Bcap-37(癌细胞) | 人结直肠腺癌细胞;LoVo |
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF | PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
hCD34+-CB-c pooled 脐带血来源的人类造血祖细胞，混合来源 100000 人脊柱间充质干细胞HVMSC | 富马酸水合酶抗体 |
膜粘连蛋白7抗体 | HRT-S1细胞，人结肠癌细胞 人横纹肌肉瘤细胞,TE671 subline No.2细胞 小鼠源细胞 |
G蛋白偶联受体12抗体 | 肺α/β水解酶蛋白1抗体 |
富马酸水合酶抗体 | 人小胶质细胞(HM) ( 5×105 ) |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
化工仪器网