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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
实验室分离的兔脊髓少突胶质采用胶原酶-酶联合消化法、元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔脊髓少突胶质经GC(Galactocerebroside)免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 兔脊髓神经少突胶质原代细胞 | 组织来源 | 脊髓 |
英文名称 | Rabbit Spinal Cord Oligodendrocyte Cells | 货号 | YS-01X8370 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
兔脊髓少突胶质细胞分离自脊髓组织；脊髓是细细的管束状的结构，位于脊柱的椎管内且被脊椎保护；是源自脑的中枢系统延伸部分。中枢系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的信息。人和脊椎动物中枢系统的一部分，在椎管里面，上端连接延髓，两旁发出成对的，分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形（蝴蝶型）灰质区，主要由细胞构成；在灰质区周围为白质区，主要由有髓纤维组成；脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的（称为脊）分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围与脑之间的通路，也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊的出入可把脊髓也分为相应的31节，31对脊就是由不同的脊椎发出的。胶质细胞，简称胶质细胞，是组织中除元以外的另一大类细胞，也有突起，但无树突和轴突之分，广泛分布于中枢和周围系统。在哺乳类动物中，胶质细胞与元的细胞数量比例约为10：1。在中枢系统（CNS）中的胶质细胞主要有星形胶质细胞、少突胶质细胞（与前者合称为大胶质细胞）和小胶质细胞等。传统认为胶质细胞属于结缔组织，其作用仅是连接和支持各种成分，其实胶质还起着分配营养物质、参与修复和吞噬的作用，在形态、化学特征和胚胎起源上都不同于普通结缔组织。
培养信息：
包被条件：PLL（0.1mg/ml）
培养基：含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：梭形、多角形
传代特性：不增殖；不传代
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔脊髓少突胶质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
小鼠胚胎成纤维细胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1) | 酪蛋白激酶3抗体 |
G蛋白偶联受体58抗体 | APS抗体 |
水解酶结构域蛋白14B抗体 | 叉头蛋白J1抗体 |
钾ATP酶蛋白a1抗体 | 酪蛋白激酶3抗体 |
叉头蛋白J1抗体 | APS抗体 |
CHODL Others Mouse 小鼠 CHODL / CHOndrolectin 人细胞裂解液 (阳性对照) | Promocell C-28015 Mesenchymal Stem CellNeurogenic Differe. Medium, 间充质干细胞性分化培养基(即用型) 100ml |
人冠状动脉内皮细胞HCAEC | SERPINE1 Others Rat 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人细胞裂解液 (阳性对照) |
HL-60(人早幼粒急性白血病细胞) 5×106cells/瓶×2 MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 人肾皮质近曲小管上皮细胞;HK-2 | 人淋巴成纤维细胞 (HLF)( 5×105 ) |
P388D1(小鼠淋巴样瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 野猪 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人细胞裂解液 (阳性对照) | GPT Others Rat 大鼠 GPT1 / GPT 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1036 | 兔脊髓神经少突胶质原代细胞叉头蛋白J1抗体 |
TSPAN7 Others Cynomolgus 食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 人细胞裂解液 (阳性对照) | 人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77 |
前脂肪细胞分化培养基PADM | TNFRSF4 Others Human 人 TNFRSF4 / CD134 人细胞裂解液 (阳性对照) |
DH82狗肾恶性组织细胞增生症细胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS | Wnt信号受体蛋白抗体 |
钾ATP酶蛋白a1抗体 | CAMKV Others Human 人 CAMKV 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
G蛋白偶联受体58抗体 | 水解酶结构域蛋白14B抗体 |
Wnt信号受体蛋白抗体 | CHODL Others Mouse 小鼠 CHODL / CHOndrolectin 人细胞裂解液 (阳性对照) |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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