详细介绍
兔脊髓神经干原代细胞
兔脊髓干细胞分离自脊髓组织;脊髓是细细的管束状的结构,位于脊柱的椎管内且被脊椎保护;是源自脑的中枢系统延伸部分。中枢系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的信息。人和脊椎动物中枢系统的一部分,在椎管里面,上端连接延髓,两旁发出成对的,分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形(蝴蝶型)灰质区,主要由细胞构成;在灰质区周围为白质区,主要由有髓纤维组成;脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的(称为脊)分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围与脑之间的通路,也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊的出入可把脊髓也分为相应的31节,31对脊就是由不同的脊椎发出的。干细胞是一类具有分裂潜能和自更新能力的母细胞,它可以通过不对等的分裂方式产生组织的各类细胞。需要强调的是,在脑脊髓等所有组织中,不同的干细胞类型产生的子代细胞种类不同,分布也不同。干细胞作为干细胞的一种,它具有其它所有干细胞的基本特征:具有自我维持和自我更新能力,具有多种分化潜能,具有分化为本系统大部分类型细胞的能力,这种自我更新和分化潜能可以维持相当长的时间甚至终生,对损伤和疾病具有反应能力。干细胞在疾病、损伤状态下具有增殖、迁移,并向细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的能力,已成为系统损伤修复和再生研究的热点,体外建立稳定的干细胞培养模型是其基础和临床应用的前提。干细胞在培养3-4d后,可形成球,球在培养基中呈悬浮生长。
英文名称 | Rabbit Spinal Cord Neural Stem Cells | 组织来源 | 脊髓 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X8369 |
细胞形态 | 球形 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:兔脊髓神经干细胞
组织来源:脊髓
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基:含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:悬浮
细胞形态:球形
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%,Accutase
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔脊髓干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的兔脊髓干采用消化后差速贴壁,结合干细胞专用培养基培养筛选制备而来,总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔脊髓干经Nestin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
M1细胞,小鼠白血病细胞 脆弱拟杆菌 新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF | 酸化肽基脯氨酞顺反异构酶Pinl抗体 |
酸化分化相关基因NDRG1抗体 | 转录因子LBX1抗体 |
肿瘤坏死因子受体超家族成员EDAR抗体 | 酸化0脂酰肌醇激酶催化亚单位A抗体 |
轴突蛋白2抗体 | 酸化肽基脯氨酞顺反异构酶Pinl抗体 |
酸化0脂酰肌醇激酶催化亚单位A抗体 | 转录因子LBX1抗体 |
CXCL12 Protein Human 重组人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) | T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795 |
HCCC-9810细胞,人肝癌亚力山大细胞 人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株,7WCY1.0细胞 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2 | Lec1(仓鼠卵巢细胞) 5×106cells/瓶×2 |
C57BL/6小鼠干细胞 Neural stem cells in C57BL/6 mice | SW-13(人肾上腺皮质癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
人结肠平滑肌细胞培养基 100mL | 人气管平滑肌细胞裂解物HTSMCL |
SW1353细胞,人骨肉瘤细胞 岛青霉 人胚胎肺成纤维细胞;WI-38 | 兔脊髓神经干原代细胞酸化0脂酰肌醇激酶催化亚单位A抗体 |
CL-0237U251(人胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2 | SERPINA3C Others Mouse 小鼠 SERPINA3C / Serpina3c 人细胞裂解液 (阳性对照) |
EVI2A Others Human 人 EVI2A 人细胞裂解液 (阳性对照) | CM-H109人破骨细胞培养基100mL |
IFNA5 Protein Human 重组人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 标签) | 酸化原癌基因c-kit抗体 |
轴突蛋白2抗体 | 家猫肺细胞;FCA-L2 |
酸化分化相关基因NDRG1抗体 | 肿瘤坏死因子受体超家族成员EDAR抗体 |
酸化原癌基因c-kit抗体 | CXCL12 Protein Human 重组人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) |
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。