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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
实验室分离的兔颌骨成纤维采用-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔颌骨成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 兔颌骨成纤维原代细胞 | 组织来源 | 颌骨 |
英文名称 | Rabbit Jaw Fibroblast Cells | 货号 | YS-01X8365 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
兔颌骨成纤维细胞分离自颌骨组织；颌骨，是指颌部的骨头，分为上颌骨和下颌骨。构成口腔上下部的骨头和肌肉组织，上部叫上颌，下部叫下颌。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔颌骨成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
小鼠胚胎成纤维细胞;3T6-Swiss albino | NIT1： 水解酶1抗体 0.2ml |
Rhesus antibody Rh MATR3/Matrin 3 核基质蛋白3抗体 规格 0.1ml | Anti-TTF-1/FITC 荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
Socs 3 (suppressor of cytokine signaling 3) 细胞因子信号传导抑制蛋白3抗原 0.5mg | Anti-p38MAPK/MAPK14 原活化蛋白激酶p38抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml |
Anti-GATA-5/FITC 荧光素标记抗GATA结合蛋白5抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SKP1 S期激酶相关蛋白1抗体 规格 0.2ml |
Anti-phospho-CaMK2a (pThr286)/FITC 荧光素标记抗0酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | Anti-ATP2c1/Ca++ ATPase/FITC 荧光素标记钙离子ATP酶通道蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
SAE1 Others Human 人 SAE1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | ECM1 Others Mouse 小鼠 ECM1 人细胞裂解液 (阳性对照) |
人黑色素瘤细胞;A875 | IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人细胞裂解液 (阳性对照) |
BT-549(人管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M093小鼠胎儿真皮成纤维细胞培养基100mL 人结直肠腺癌细胞;LoVo | AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A1) Heteroimer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
TNFRSF17 Others Human 人 TNFRSF17 / BCMA / CD269 人细胞裂解液 (阳性对照) | TNFRSF14 Others Cynomolgus 食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 人细胞裂解液 (阳性对照) |
EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8 | 兔颌骨成纤维原代细胞Anti-p38MAPK/MAPK14 原活化蛋白激酶p38抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml |
NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (EGF Domain) 人细胞裂解液 (阳性对照) | 绿色荧光蛋白标记小鼠前胃癌细胞;MFC-GFP |
前列腺上皮细胞生长添加物PEpiCGS | 人少突胶质前体细胞(HOPC-os)(悬浮生长) 人间充质干细胞-脐带 U251人胶质瘤细胞 |
狗肺成纤维样细胞;DogL1 非洲绿猴肾细胞，VERO C1008细胞 N/N1003A(RLE)细胞，兔晶体上皮细胞永生系 | GABA Transporter 3： γ基运载蛋白3抗体 0.2ml |
Human lymphocyte function associated antigen 2,LFA-2 ELISA Kit 人淋巴细胞功能相关抗原2Multi-class antibodies规格： 48T | CD4 Others Ferret 雪貂 CD4 / Leu-3 人细胞裂解液 (阳性对照) |
CD34抗体(细胞表面的唾液粘蛋白) Anti-CD34 0.1ml | DHEA-S ELISA Kit 大鼠脱氢表雄酮酯 96T |
Phospho-ATP1A1 (Ser16)： 0酸化ATP酶蛋白a1抗体 0.1ml | SAE1 Others Human 人 SAE1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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