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详细介绍
兔海绵体平滑肌原代细胞
兔海绵体平滑肌细胞分离自海绵体组织；海绵体，又称海绵体肌，是硬的平滑肌和结缔组织。海绵体是一种勃起组织，外面包有坚厚的白膜，内部由结缔组织和平滑肌组成海绵状支架，其腔隙与血管相通。它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中，在消化海绵体组织时，胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系，破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。因此可用胶原酶分离出海绵体平滑肌细胞。平滑肌，是非横纹肌的肌肉组织。分布在人体动脉和静脉血管壁、膀胱、子宫、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫状肌和虹膜。平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
英文名称 | Rabbit Corpora Cavernous Smooth Muscle Cells | 组织来源 | 海绵体 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X7954 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称：兔海绵体平滑肌细胞
组织来源：海绵体
产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态佳
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔海绵体平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的兔海绵体平滑肌采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔海绵体平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 人胰腺癌细胞，NCL-H548细胞 MDCK (NBL-2)(狗肾细胞) | Rhesus antibody Rh GDF8 生长分化因子8/肌肉抑制素抗体 规格 0.2ml |
I CTP(Human Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型胶原交联羧基末端肽Multi-class antibodies规格： 48T | IgG/Gold 胶体金标记的小鼠抗大鼠IgG 2ml |
IL-9： 白介素9抗体 0.1ml | Human anti-IgA antibody ELISA Kit 人抗IgA抗体 96T |
Rhesus antibody Rh RENBP 肾素结合蛋白抗体 规格 0.2ml | Anti-Leptin receptor(long)/FITC 荧光素标记瘦素受体抗体(长)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-STAT6(Tyr641) 0酸化信号转导和转录激活因子6抗体 规格 0.1ml | sMHC-1(Mouse soluble myosin heavy chain 2) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重链1 96T |
人恶性黑色素瘤细胞;A-375 [A375] | CL-0439SK-CO-1(人结直肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2 |
人细胞;Hela P10s-11F 大鼠血管外膜成纤维细胞培养基 100mL | 4T1 小鼠癌细胞 |
小肠隐窝上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) | NCI-H23(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高转移细胞 | 人气管上皮细胞裂解物HTEpiCL |
MEG-01细胞，人成巨核细胞白血病细胞 正常小鼠Leydig细胞,TM3细胞 间充质干细胞生长添加物MSCGS | 兔海绵体平滑肌原代细胞Human anti-IgA antibody ELISA Kit 人抗IgA抗体 96T |
III型胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL | ADAM12 Others Human 人 ADAM12 人细胞裂解液 (阳性对照) |
FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人细胞裂解液 (阳性对照) | CM-H105人皮下脂肪细胞培养基100mL |
体细胞;HEL | Rhesus antibody Rh APAF1(NT) 凋亡蛋白活性因子-1抗体(N端) 规格 0.1ml |
BDP： 母细胞瘤相关蛋白ARID3B抗体 0.2ml | MHCC97-H 高转移人肝癌细胞 |
Anti-VEGF-A/FITC 荧光素标记血管内皮生长因子A抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | PRSS3： 脑酶3抗体 0.2ml |
Anti-CDK8/FITC 荧光素标记周期素依赖性激酶8抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | 人恶性黑色素瘤细胞;A-375 [A375] |
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
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