详细介绍
兔骨原代细胞
兔骨细胞分离自骨组织;骨组织的细胞成分包括骨原细胞、成骨细胞、骨细胞和破骨细胞。只有骨细胞存在于骨组织内,其他三种细胞均位于骨组织的边缘。骨细胞(Osteocyte)是人体骨骼中主要的细胞成分。在成年人骨骼中,骨细胞占细胞总数量的90%~95%,大约是成骨细胞数量的20倍。骨细胞生长在骨骼内部的骨基质中。骨细胞的细胞体呈梭形或类圆形,位于基质构成的骨陷窝内。与细胞类似,每个骨细胞具有大量向外延伸的突触,而这些突触均位于由骨基质构成的骨小管结构中。通过这些突触,骨细胞能够与骨表面的细胞、周围其它的骨细胞进行“交流"。普遍认为,骨细胞起源于成骨细胞。在骨形成的终末阶段,成骨细胞将可能有3种不同的归宿:分化成为骨细胞、转移至骨表面成为暂不活动的成骨细胞、进入程序死亡过程(凋亡)。骨细胞为扁椭圆形多突起的细胞,核亦扁圆、染色深。胞质弱嗜碱性。电镜下,胞质内有少量溶酶体、线粒体和粗面内质网,高尔基复合体亦不发达。骨细胞夹在相邻两层骨板间或分散排列于骨板内。相邻骨细胞的突起之间有缝隙连接。在骨基质中,骨细胞胞体所占据的椭圆形小腔,称为骨陷窝,其突起所在的空间称骨小管。相邻的骨陷窝借骨小管彼此通连。骨陷窝和骨小管内均含有组织液,骨细胞从中获得养分。
英文名称 | Rabbit Osteocyte Cells | 组织来源 | 骨 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X7797 |
细胞形态 | 梭形、多角形 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:兔骨细胞
组织来源:骨
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:不增殖;不传代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔骨细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的兔骨采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔骨经骨钙素免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
NEI-H209细胞,小细胞肺癌细胞 人前列腺癌细胞,22RV1细胞 人脉络丛成纤维细胞RNAHCPF miRNA5 μg | ABCE1: 核糖核酸酶L抑制蛋白抗体 0.2ml |
Anti-HSTF2/HSF2 热休克转录因子2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh 5-HTR4 5-羟色胺受体4抗体 规格 0.1ml |
Anti-CCL11/FITC 荧光素标记嗜酸粒细胞趋化蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh human serum 人血清抗体 规格 0.2ml |
HisX6 聚组酸标签蛋白 0.5mg | Phospho-HER2 (Tyr877): 0酸化HER2受体抗体 0.1ml |
IgG/Cy3 Cy3标记的羊抗小鼠IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh factor VIII(FVIII) 第八因子相关抗原抗体 规格 0.1ml |
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B | 人心室肌细胞培养基 100mL |
PC-12细胞,大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化) 22RV1(前列腺癌细胞) 人肝癌细胞;SMMC-7721 | PF4 Protein Human 重组人 CXCL4 / PF4 蛋白 |
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92MI [NK92MI] | 中国仓鼠卵巢细胞;TPO-CHO-I |
Caco-2,人结直肠腺癌细胞 | 人正常前列腺基质永生化细胞;WPMY-1 |
SP2/0细胞,骨髓瘤细胞 人经典小细胞肺癌细胞,NCI-H1688细胞 CL-0404NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 | 兔骨原代细胞Rhesus antibody Rh human serum 人血清抗体 规格 0.2ml |
VEGFA Protein Human 重组人 VEGF121b / VEGF-A 蛋白 | TNFSF13 Others Mouse 小鼠 TNFSF13 人细胞裂解液 (阳性对照) |
EB (NBL-4)细胞,牛胚气管细胞 SW 1088[SW-1088; SW1088](人脑星型胶质瘤细胞) CM-H018人成纤维细胞培养基100mL | 人肺成纤维细胞HPF |
rCSC, 大鼠心肌细胞 | Rhesus antibody Rh IgM/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗人IgM 规格 0.1ml |
Human mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit 人癌标志物-CA153 96T | 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C2 |
CD80/B7-1(human) 人刺激分子B7-1蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | LH(Human luteotropic hormone) ELISA Kit 激素Multi-class antibodies规格: 48T |
Manic Fringe: 狂躁基因同源蛋白MFNG抗体 0.2ml | 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B |
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。