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详细介绍
兔骨髓来源内皮祖原代细胞
兔骨髓来源内皮祖细胞分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞，亦称为成血管细胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞，缺乏成熟内皮细胞的特征性表型，不能形成管腔样结构，其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。研究显示，内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用，并为缺血性疾病的研究治疗提供了新思路，EPCs生物学特性和治疗作用的研究成为这一领域新的热点。
英文名称 | Rabbit Bone Marrow-Derived Endothelial Progenitor Cells | 组织来源 | 骨髓 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X8358 |
细胞形态 | 内皮细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称：兔骨髓来源内皮祖细胞
组织来源：骨髓
产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶
包被条件：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基：含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：内皮细胞样
传代特性：可传1-2代；不建议多次传代
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔骨髓来源内皮祖细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的兔骨髓来源内皮祖采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔骨髓来源内皮祖经CD34免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
FD4细胞，人淋巴细胞与仓鼠肺细胞杂交细胞 小鼠畸胎瘤细胞,F9细胞 CM-H095人骨骼肌细胞培养基100mL | Rhesus antibody Rh GDF8/MSTN 生长分化因子8抗体 规格 0.2ml |
TGM2(human transglutaminase 2C polypeptide) ELISA Kit 人转谷氨酶2C多肽Multi-class antibodies规格： 48T | IgG/Cy5 Cy5标记的小鼠抗IgG 0.1ml |
IDH1： 异柠檬酸脱氢酶1抗体 0.2ml | CT(Mouse Calcitonin)ELISA Kit 小鼠降钙素 96T |
Rhesus antibody Rh RENT1/hUPF1 ATP依赖解旋酶RENT1抗体 规格 0.2ml | Anti-Leptin receptor/FITC 荧光素标记瘦素受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Stathmin 1 (Ser24) 0酸化原癌基因蛋白18抗体 规格 0.1ml | CD4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit 人CD4分子 96T |
P388D1(小鼠淋巴样瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 | EC9706 食管癌 |
SW620人结肠癌细胞 SW620 human colon cancer cells L-15+10%FBS | TNFSF8 Protein Rat 重组大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签) |
大鼠脑动脉血管内皮细胞培养基 100mL | IFNA10 Protein Human 重组人 Ierferon alpha 10 / IFNA10 蛋白 (Fc 标签) |
人胎儿胸腺细胞株;HFT-8810 [HFT8810] | 人肺动脉平滑肌细胞裂解物HPASMCL |
Hs 746T人胃癌细胞 Hs human gasic cancer cells 746T DMEM+10% FBS | 兔骨髓来源内皮祖原代细胞CT(Mouse Calcitonin)ELISA Kit 小鼠降钙素 96T |
CL-0235TSCCa(人舌鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 | P815(小鼠肥大细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD1B & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) |
SELE Others Rat 大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 人细胞裂解液 (阳性对照) | CM-H101新生儿表皮角化细胞培养基100mL |
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21 | Rhesus antibody Rh APBB1/Fe65 protein 铁蛋白Fe65抗体 规格 0.1ml |
beta subunit Cholera Toxin： 肠毒素β链抗体 0.2ml | HCT-15 人结肠癌细胞 |
Anti-VEGF/FITC 荧光素标记VEGF抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | PLAC8： 胎盘特异基因8蛋白抗体 0.2ml |
Anti-CDK6/FITC 荧光素标记周期素依赖性激酶6抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | P388D1(小鼠淋巴样瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
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