详细介绍
兔骨髓单核原代细胞
兔骨髓单核细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单核细胞是一种未成熟的单核细胞,在骨髓细胞中约占0.04%,被认为是破骨细胞的前体细胞,较外周血单个核细胞诱导的破骨细胞得率高、全骨髓诱导法产生的破骨细胞数量多,纯度高,较脾细胞诱导法分化效率高。骨髓单核细胞(BMMNCs)是从股骨或胫骨骨髓中分离提取出来的原代细胞,它属干细胞类型。目前,大多数研究用淋巴细胞分离液分离提取骨髓单核细胞,近也有采用免疫磁珠分离法分离骨髓单核细胞。
英文名称 | Rabbit Bone Marrow Monocyte Cells | 组织来源 | 骨髓 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X7068 |
细胞形态 | 巨噬细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:兔骨髓单核细胞
组织来源:骨髓
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 巨噬细胞样
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介
公司实验室分离的兔骨髓单核采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的兔骨髓单核经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
B95-8细胞,EBV 转化的绒猴白细胞 人大肠癌细胞,CL187/CCL187细胞 CM-H125人脑成纤维细胞培养基100mL | Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B细胞淋巴瘤因子2 96T |
RNF128: 环指蛋白128抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh PTP1B 蛋白酪0酸酶-1B 规格 0.1ml |
Anti-HER3/ErbB3 /FITC 荧光素标记HER3受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | CCDC47: 卷曲螺旋结构域蛋白47抗体 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Bone sialoprotein 骨涎蛋白抗体 规格 0.1ml | Anti-CXC-R2/FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
纤维母细胞生长因子受体1抗体 Anti-FGFR1 0.1ml | AKAP13: 蛋白激酶锚定蛋白13抗体 0.1ml |
大鼠肝细胞;BRL 3A | 大鼠肝动脉内皮细胞培养基 100mL |
HMy2.CIR人B淋巴母细胞 HMy2.CIR human B lymphoblastoid cell IMDM培养基(GIBCO)+20%FBS | FGF9 Protein Canine 重组狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 标签) |
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38] | 仓鼠肾细胞;HL-1 |
蚊子幼虫体细胞;Aedes albopictus clone C6/36 | CL-0127JEG-3(人绒毛膜癌细胞)5×106cells/瓶×2 |
VERO细胞,非洲绿猴肾细胞 人大细胞肺癌细胞,NCI-H661细胞 CL-0420R 1610(仓鼠肺细胞)5×106cells/瓶×2 | 兔骨髓单核原代细胞CCDC47: 卷曲螺旋结构域蛋白47抗体 0.2ml |
非洲绿猴肾细胞;VERO-76 | 人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77 大鼠肾成纤维细胞培养基 100mL |
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0910 真皮成纤维细胞培养基 100mL | 牛肾细胞;MDBK |
人永生化淋巴细胞;CNLMG-B5538LC | IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗大鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GRGDS(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser) 兔抗粘附多肽抗体 规格 0.2ml | 人上皮细胞RNAHMEpiC miRNA5 μg |
ETFB: 电子转移黄素蛋白β肽/黄素蛋白抗体 0.2ml | Anti-M2-PK/PKM2 酸激酶-M2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
ON(Mouse osteonectin) ELISA Kit 小鼠骨粘连蛋白Multi-class antibodies规格: 48T | 大鼠肝细胞;BRL 3A |
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。