详细介绍
兔骨骼肌成纤维原代细胞
兔骨骼肌细胞分离自四肢肌肉组织;骨骼肌又称横纹肌,肌肉中的一种,约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞,肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌,横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官,有丰富的血管、淋巴分布,在躯体支配下收缩或舒张,进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带(Ⅰ带)及暗带(A带)。明带染色较浅,而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间,有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段,叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞,细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方,细胞多呈梭行,具有一定的方向性。
英文名称 | Rabbit Skeletal Muscle Fibroblast Cells | 组织来源 | 骨骼肌 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X7949 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:兔骨骼肌成纤维细胞
组织来源:骨骼肌
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔骨骼肌成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的tu骨骼肌成纤维采用-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔骨骼肌成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
人恶性黑色素瘤细胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌细胞培养基 100mL | CXCR3 ELISA Kit 大鼠CXC趋化因子受体3 96T |
Rab27a: RAM-11抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh PTPH1/PTPN3 蛋白酪0酸酶H1抗体 规格 0.2ml |
Anti-Phospho-HER2 (Tyr877)/FITC 荧光素标记0酸化HER2受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | CCDC43: 卷曲螺旋结构域蛋白43抗体 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Bone Sialoprotein/BSP 骨涎蛋白 规格 0.1ml | Anti-CXC-R1 /FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
角质形成细胞生长因子受体抗体 Anti-KGFR 0.2ml | AP1M2: AP-1μ2抗体 0.1ml |
M1 小鼠白血病细胞 | CM-R002大鼠肺血管平滑肌细胞培养基100mL |
NCI-N87细胞,人胃腺癌细胞 人跟骨髓瘤细胞,Hp2/o细胞 草鱼肾细胞;GIK | DH82(犬巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2 |
大鼠脑膜细胞培养基 100mL | IFNA4 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 标签) |
SK-N-SH, 人母细胞瘤细胞 | CL-0124IMR-32(人母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2 |
MCF 10A人正常上皮细胞 MCF 10A of normal human mammary epithelial cells MEGM Bullet Kit(Clonetics Corparation CC-3150)+100ng/ml choleratoxin(Sigma C8052) | 兔骨骼肌成纤维原代细胞CCDC43: 卷曲螺旋结构域蛋白43抗体 0.2ml |
非洲绿猴肾细胞;VERO-76 | P815细胞,小鼠肥大细胞癌细胞 V79-4(中国仓鼠肺细胞) 非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C |
HBdMEC-c 人膀胱微血管内皮细胞(HBdMEC) 500,000cells 皮下脂肪细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) | IL17A Protein Human 重组人 IL17 / IL17A 蛋白 (His 标签) |
人脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C | IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗大鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GRIM19 干扰素/维诱导凋亡相关基因抗体 规格 0.1ml | 人上皮细胞HMEpiC |
EMSY: EMSY蛋白抗体 0.2ml | Anti-LYVE-1 淋巴管内皮透明质酸受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
TSP-1(Mouse thrombospondin 1) ELISA Kit 小鼠血小板反应蛋白/敏感蛋白1Multi-class antibodies规格: 48T | M1 小鼠白血病细胞 |
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。