详细介绍
兔肝非实质原代细胞
兔肝非实质细胞分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。肝实质细胞具有肝功能的单位,是肝脏的基本组成单位之一。肝非实质细胞是指除了肝实质细胞之外的细胞,主要包含了肝窦内皮细胞、肝星状细胞、肝枯否细胞。
英文名称 | Rabbit Hepatic Nonparenchymal Cells | 组织来源 | 肝 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X8350 |
细胞形态 | 圆形 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:兔肝非实质细胞
组织来源:肝
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:悬浮
细胞形态:圆形
传代特性:不增殖;不传代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔肝非实质细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的兔肝非实质采用取肝脏灌流、胶原酶消化、密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔肝非实质经过检测,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
7WML6.0细胞,人APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株 生孢梭菌 狗肺成纤维样细胞;DogL1 | Rhesus antibody Rh GDIA1 转移抑制基因GDIA1抗体 规格 0.1ml |
SP-A(Human Pulmonary surfatcant-associated protein A) ELISA Kit 人肺表面活性物质相关蛋白AMulti-class antibodies规格: 48T | IgG/PE PE标记的小鼠抗IgG 0.1ml |
IL-8: 白介素8抗体 0.1ml | ANNA-1/Hu(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗元核抗体1型/抗Hu抗体 96T |
Rhesus antibody Rh RERE 肌相关蛋白1抗体 规格 0.2ml | Anti-LDL-R/FITC 荧光素标记低密度脂蛋白受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Phospho-Stathmin(Ser38) 0酸化原癌基因蛋白18抗体 规格 0.1ml | MUC5AC(Mouse Mucin-5 subtype AC) ELISA Kit 小鼠粘蛋白/粘液素5AC 96T |
PPBP Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 标签) | EJ 人膀胱癌细胞 |
SW1116人结肠腺癌细胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培养基(GIBCO)+10%FBS | CD70 Protein Rat 重组大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 标签) |
人胚肾细胞(亚系克隆);FIP293 | 人胚胎,皮肤,肌肉;M-22 |
人食管上皮细胞培养基 100mL | 人食道平滑肌细胞裂解物HESMCL |
豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM4 中国仓鼠体细胞,R 1610细胞 IAR20细胞,大鼠肝细胞 | 兔肝非实质原代细胞ANNA-1/Hu(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗元核抗体1型/抗Hu抗体 96T |
人肺动脉成纤维细胞培养基 100mL | EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人细胞裂解液 (阳性对照) |
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/ Yamaguchi/7/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) | CM-H095人骨骼肌细胞培养基100mL |
IFNA4 Protein Human 重组人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 标签) | Rhesus antibody Rh APC6/CDC16 细胞分裂周期蛋白16抗体 规格 0.2ml |
phospho-BCAR1(Tyr165): 0酸化癌抗雌激素耐药蛋白1抗体 0.1ml | 非洲绿猴肾细胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7 |
Anti-Slug/FITC 荧光素标记锌指转录因子Slug抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | PBOV1: 前列腺癌和癌高表达蛋白抗体 0.2ml |
Anti-CDK3 /FITC 荧光素标记周期素依赖性激酶3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | PPBP Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 标签) |
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。