详细介绍
兔肝动脉内皮原代细胞
兔肝动脉内皮细胞分离自肝动脉组织;在胚胎期,肝脏有3条动脉供血,分别来源于胃左动脉、腹腔动脉和肠系膜上动脉,这3条动脉分别肝脏的不同部位。出生后,一般保留一条动脉,大部分为起源于腹腔动脉的动脉,由其分出左、右肝动脉左、右半肝。偶尔也可见起源于胃左动脉的动脉或起源于肠系膜上动脉的动脉。但也有2条动脉并存的情况,如起源于腹腔动脉和起源于胃左动脉(25%),起源于腹腔动脉和起源于肠系腊上动脉(10%),而起源于胃左动脉和起源于肠系膜上动脉的2条动脉同时存在的情况比较少见。此外,还有5%像胚胎期一样,3条动脉同时存在。这种起源于腹腔动脉以外的肝动脉称为迷走肝动脉,如果肝脏没有起源于腹腔动脉的动脉供血时,此种异位起源的肝动脉称替代动脉,如果在常见肝动脉类型外,还有一支这种异位起始的动脉肝脏的一部分血流,这种肝动脉称副肝动脉。肝动脉内皮细胞是衬于肝动脉内表面的单层扁平上皮,在炎症时高表达黏附分子,与血流中白细胞表面黏附分子相互作用,从而介导白细胞穿越血管壁,亦属一类非专职抗原提呈细胞。它们吞噬异物、细菌、坏死和衰老的组织,还参与集体免疫活动,包括:①血管收缩及血管舒张,从而控制血压;②凝血(血栓形成及纤维蛋白溶解);③动脉硬化;④血管生成;⑤炎症及肿胀(浮肿);⑥内皮细胞亦控制一些物质,如白血球进出血管。
英文名称 | Rabbit Hepatic Artery Endothelial Cells | 组织来源 | 肝动脉 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X8348 |
细胞形态 | 内皮细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:兔肝动脉内皮细胞
组织来源:肝动脉
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔肝动脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的兔肝动脉内皮采用混合酶消化法结合差速贴壁法,并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔肝动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
小鼠母细胞瘤细胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] | Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr320) 0酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit 人0酯酶Cγ链 96T | Anti-Moesin/FITC 荧光素标记膜突蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Thrombospondin 2 血小板反应蛋白2/敏感蛋白2抗体 规格 0.2ml | AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗肾上腺皮质抗体Multi-class antibodies规格: 48T |
HAS2: 透明质酸合成酶2抗体 0.1ml | Rhesus antibody Rh Cathelicidin 抗菌肽CAMP抗体 规格 0.1ml |
phospho-FOXO4 (Thr451): 0酸化叉头蛋白4抗体 0.1ml | TSH ELISA Kit 大鼠促甲状腺素Multi-class antibodies规格: 48T |
EPHA2 Others Human 人 EphA2 (aa 585-976) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | Sars结构蛋白表达株;293sars181A 人膀胱上皮细胞培养基 100mL |
人急性早幼粒白血病细胞;HL-60 | PPP3R1 Others Human 人 PPP3R1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
HA Others H13N8 甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) | DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人细胞裂解液 (阳性对照) |
LYPD3 Others Mouse 小鼠 LYPD3 / MIG-C4 人细胞裂解液 (阳性对照) | COCH Others Human 人 COCH / Cochlin ( isoform short ) 人细胞裂解液 (阳性对照) |
HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系 | 兔肝动脉内皮原代细胞AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗肾上腺皮质抗体Multi-class antibodies规格: 48T |
KU812(人外周血嗜碱性白血病细胞) 5×106cells/瓶×2 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人细胞裂解液 (阳性对照) | 人间充质干细胞-肝 |
人上皮细胞;MCF-10A | 非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4- 畸胎瘤细胞,F9细胞 BEL-7404(肝癌细胞) |
CD63 Others Sus scrofa (Pig) 野猪 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-Rad52/FITC 荧光素标记Rad52抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
osteopontin: 骨桥蛋白抗体(分泌型0蛋白1) 0.1ml | CD40 Others Human 人 CD40 / TNFRSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) |
SorLA/LRP9: 低密度脂蛋白受体相关蛋白9抗体 0.2ml | phospho-CDC27 (Thr244): 0酸化后期促进复合蛋白3抗体 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/AP 碱性0酸酶(AP)标记的驴抗豚鼠IgG 规格 0.1ml | EPHA2 Others Human 人 EphA2 (aa 585-976) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。