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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
实验室分离的兔腹膜间皮采用混合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔腹膜间皮经PCK、Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 兔腹膜间皮原代细胞 | 组织来源 | 腹膜 |
英文名称 | Rabbit Peritoneal Mesothelial Cells | 货号 | YS-01X8346 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
兔腹膜间皮细胞分离自腹膜组织；腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜，主要由间皮细胞构成，藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官，能分泌黏液润湿脏器的表面，减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和组织经由腹膜与外界相连；腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜（peritoneum）为全身面积大、配布复杂的浆膜，由皮及少量结缔组织构成，薄而光滑，呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄层；覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行，共同围成不规则的潜在性腔隙，称为腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液，在脏器活动时可减少摩擦。腹膜间皮细胞属于上皮组织中的单层扁平上皮，是覆盖于腹膜表面的一层细胞。间皮细胞是构成间皮的细胞，正常大小约为15-25微米，细胞常呈圆形或者卵圆形。其功用是提供润滑，使器官与器官、器官与胸膜与腹膜间都能得到良好的保护，不会互相磨损受伤。而间皮所生产的润滑和保护作用就是靠间皮细胞所分泌的物质来达成，分泌物多半为细胞外基质、玻尿酸类物质。
培养信息：
包被条件：PLL（0.1mg/ml）
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传1-2代
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔腹膜间皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
SF767细胞，人脑瘤细胞 阴沟肠杆菌 人主动脉内皮细胞总RNAHAEC NA | Rhesus antibody Rh GDIA2/ARHGDIB 转移抑制基因GDIA2抗体 规格 0.1ml |
AACT(Human Alpha1 Antichymotrypsin) ELISA Kit 人α1抗胰白酶Multi-class antibodies规格： 48T | IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的小鼠抗IgG 0.1ml |
IRX5： Iroquois同源蛋白5抗体 0.2ml | anti-DNase B(Human anti-deoxyribonuclease B) ELISA Kit 人抗DNA酶B抗体 96T |
Rhesus antibody Rh RERG Ras相关雌激素调节生长抑制蛋白 规格 0.2ml | Anti-LDL/FITC 荧光素标记低密度脂蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-STXBP1(Ser515) 0酸化突触前膜胞内蛋白抗体 规格 0.1ml | AChE ELISA Kit 大鼠乙酰酯酶 96T |
RKO-E6(人结肠癌转基因细胞) 5×106cells/瓶×2 | 犬肾细胞;MDCK(NBL-2) |
801-D细胞，人巨细胞性肺癌细胞 转入Tet-off调控，含EGFP基因的CHO细胞,CHO-AA8细胞 CM-M026小鼠骨髓基质细胞培养基100mL | Sf-21(昆虫细胞) 5×106cells/瓶×2 |
人正常肺上皮细胞;BEAS-2B | CW-2(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
U-87 MG人脑星形胶质母细胞瘤 U-87 MG of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS | 人牙周膜成纤维细胞裂解物HPLFL |
769-P细胞，人肾癌细胞系(769-P) 中国仓鼠仓鼠肺细胞,R1610细胞 CL-0406NCI-H838(人非小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2 | 兔腹膜间皮原代细胞anti-DNase B(Human anti-deoxyribonuclease B) ELISA Kit 人抗DNA酶B抗体 96T |
眼晶状体上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) | EPHA6 Others Mouse 小鼠 EphA6 / EHK-2 人细胞裂解液 (阳性对照) |
MAP4K5 Others Human 人 MAP4K5 / MEKKK5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | CM-H093人颅盖造骨细胞培养基100mL |
IFNG Protein Human 重组人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白 | Rhesus antibody Rh APC70/CRSP70 转录激活蛋白crsp70抗体 规格 0.2ml |
phospho-BCAR1 (Tyr249)： 0酸化癌抗雌激素耐药蛋白1抗体 0.1ml | CM-R016大鼠胰腺星状细胞培养基100mL |
Anti-TRADD/FITC 荧光素标记有死亡区的坏死因子受体1相关蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | PHLP： 抑制基因PHLPP抗体 0.2ml |
Anti-CDK2/FITC 荧光素标记周期素依赖性激酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | RKO-E6(人结肠癌转基因细胞) 5×106cells/瓶×2 |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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