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详细介绍
兔肺微血管平滑肌原代细胞
兔肺微血管平滑肌细胞分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。肺血管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。肺血管平滑肌细胞主要功能：①细胞表面表达介质（ICAM-1和VCAM-1）参与血管壁炎症反应；②是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺血管平滑肌细胞与主要病生理变化：①平滑肌增生易致肺动脉高压；②先天性肺动脉狭窄；③肺动脉栓塞。血管平滑肌细胞的加速生长潜能是血管疾病进展的关键因素，新研究表明血管平滑肌细胞表达的ICAM-1和VCAM-1能促进血管壁的炎症反应，并且与血管疾病的发展及稳定性有关。
英文名称 | Rabbit Pulmonary Microvascular Smooth Muscle Cells | 组织来源 | 肺 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X8341 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称：兔肺微血管平滑肌细胞
组织来源：肺
产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传3代左右
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔肺微血管平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的兔肺微血管平滑肌采用混合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔肺微血管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
小鼠肾足细胞;Mouse podocyte | NIS： 转运体蛋白抗体 0.2ml |
Rhesus antibody Rh MBNL3 毒蕈碱样蛋白3抗体 规格 0.2ml | Anti-TSHR(NT)/FITC 荧光素标记促甲状腺素受体抗体(N端)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
SRF(Serum response factor) 血清应答因子抗原 0.5mg | Anti-P16 抑癌基因p16抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml |
Anti-GAPDH/FITC 荧光素标记3-0酸甘油醛脱氢酶IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC14A1/RACH1 尿素转运型糖蛋白抗体 规格 0.2ml |
Anti-Phospho-FAK (Tyr925) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠0酸化粘着斑激酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | Anti-ATF6/FITC 荧光素标记活化转录因子6抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
TNFRSF9 Others Canine 狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 人细胞裂解液 (阳性对照) | 双位点HC-kit受体细胞株;DMF7 人子宫内膜上皮细胞培养基 100mL |
人脊髓星形胶质细胞总RNAHA-sp NA | PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
MDA-MB-436(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 L929(成纤维细胞) | TEK Others Cynomolgus 食蟹猴 Tie2 / TEK 人细胞裂解液 (阳性对照) |
FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人细胞裂解液 (阳性对照) | IgG3 Others Mouse 小鼠 IgG3-Fc 人细胞裂解液 (阳性对照) |
II型肺泡上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) | 兔肺微血管平滑肌原代细胞Anti-P16 抑癌基因p16抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml |
ITK Others Mouse 小鼠 ITK Kinase (aa 351-619) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | CCL11 Protein Human 重组人 CCL11 蛋白 (His 标签) |
气管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) | LCN2 Others Human 人 LCN2 / NGAL 人细胞裂解液 (阳性对照) |
狗肾细胞;Super Tube 胚胎成纤维细胞，3T6-Swiss albino细胞 Hed68细胞，果子狸肾上皮细胞 | GIMAP7： GTP酶IMAP家族成员7抗体 0.2ml |
Human thrombomodulin,TM ELISA Kit 人血栓调节蛋白Multi-class antibodies规格： 48T | ALCAM Others Rat 大鼠 ALCAM / CD166 人细胞裂解液 (阳性对照) |
纤毛蛋白-2抗体 Anti-NRP-2 0.1ml | E3 ELISA Kit 大鼠雌三醇 96T |
phospho-ATM(Ser1981)： 0酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体 0.1ml | TNFRSF9 Others Canine 狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 人细胞裂解液 (阳性对照) |
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
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