化工仪器网
详细介绍
兔肠道干原代细胞
兔肠道干细胞分离自肠道组织；肠道指的是从胃幽门至门的消化管。肠是消化管中长的一段，也是功能重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便，再通过直肠经门排出体外。肠道堪称身体劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足够的养分，其实它的功能还远不止此——它还是机体内大的微生态系统。肠道干细胞（ISC）也称肠道上皮干细胞，主要位于肠黏膜隐窝内，其与肠道黏膜上皮的更新和修复密切相关。正常情况下，位于隐窝基底部的肠道干细胞不断向隐窝顶部（肠腔方向）迁移，整个迁移过程大约3-5d，在迁移过程中肠道干细胞分化形成不同的肠黏膜细胞。当受到外界生理或病理信号作用时，ISC可持续增殖、分化为成熟肠上皮细胞，如肠型细胞、杯状细胞、内分泌细胞和潘氏细胞等，从而维持肠道黏膜结构和功能的稳定性。
英文名称 | Rabbit Intestinal Stem Cells | 组织来源 | 肠 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X8325 |
细胞形态 | 球形 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称：兔肠道干细胞
组织来源：肠
产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：悬浮
细胞形态：球形
传代特性：可传3代左右
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔肠道干细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的兔肠道干采用-胶原酶联合消化后，用肠道干细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔肠道干经MSI-1免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
小鼠心肌细胞MCM | histon-H2b ELISA Kit 大鼠组蛋白H2bMulti-class antibodies规格： 48T |
Actin Regulatory Protein CAPG： 肌动蛋白调节蛋白CAPG抗体 0.2ml | GABRR1： G基A型受体rho1 /GABAA Rρ1抗体 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CEACAM16/CEAL2 癌胚抗原相关细胞粘附分子16抗体 规格 0.2ml | PARP： 多腺苷二0酸多聚酶抗体(N端) 0.1ml |
Anti-NPY2R/FITC 荧光素标记肽Y受体2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的丝/苏酸激酶抗原 0.5mg |
IgA/Gold 金标记兔抗人IgA(10nm/15nm)Multi-class antibodies规格： 0.5ml | 7-Mar： 膜相关环指蛋白7抗体 0.1ml |
CD8B Others Human 人 CD8B / P37 / LEU2 人细胞裂解液 (阳性对照) | SV40T转化人脐静脉内皮细胞;PUMC-HUVEC-T1 人膀胱成纤维细胞培养基 100mL |
人角膜上皮细胞RNAHCEpiC miRNA5 μg | EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人细胞裂解液 (阳性对照) |
hMo-PB-c single donorpre-screened 外周血来源的人类单核细胞，单一来源，预选型 10 million 人绒毛间充质成纤维细胞HVMF | GPC3 Others Mouse 小鼠 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
Promocell C-27438 Adipocyte Nuition Medium, 脂肪细胞营养培养基(即用型) 500ml | OP9小鼠骨髓基质细胞 OP9 mouse bone marrow somal cells a-MEM培养基+20%FBS |
MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞 | 兔肠道干原代细胞PARP： 多腺苷二0酸多聚酶抗体(N端) 0.1ml |
人胰腺导管癌细胞;CFPAC-1 大鼠脑微血管内皮细胞培养基 100mL | 人结肠平滑肌细胞总RNAHCSMC NA |
大鼠输尿管上皮细胞培养基 100mL | SERPINI1 Others Mouse 小鼠 SerpinI1 / Neuroserpin 人细胞裂解液 (阳性对照) |
hCD34+-CB-c single donor 从脐带血提取的人类CD34+祖细胞(hCD34+-CB)，单一来源 100000 人卵巢成纤维细胞HOF | Anti-IL-17/FITC 荧光素FITC标记白介素-17抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
Anti-phospho-RUNX1/AML1(Ser249) 0酸化急性髓细胞白血病1蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml | CL-0393NCI-H209(人小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2 |
Rhesus antibody Rh Phospho-p57 Kip2 (Thr310) 0酸化周期蛋白依赖激酶抑制因子1C抗体 规格 0.1ml | Rhesus antibody Rh Kinesin 驱动蛋白KNS1抗体 规格 0.2ml |
IL-7(Rat Interleukin-7) ELISA kit 大鼠白介素7 96T | CD8B Others Human 人 CD8B / P37 / LEU2 人细胞裂解液 (阳性对照) |
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
化工仪器网