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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
实验室分离的兔鼻黏膜成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过成纤维细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔鼻黏膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 兔鼻黏膜成纤维原代细胞 | 组织来源 | 鼻黏膜 |
英文名称 | Rabbit Nasal Mucosal Fibroblast Cells | 货号 | YS-01X8318 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
兔鼻黏膜成纤维细胞分离自鼻黏膜组织；黏膜是覆盖在机体内消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔内壁的一层组织结构，由上皮组织和疏松结缔组织构成。根据部位不同，有口腔黏膜、胃肠黏膜、鼻腔黏膜、气管黏膜、阴道黏膜、眼睑黏膜等不同名称。它们的结构也因功能、部位不一而不尽相同。鼻腔黏膜，简称鼻黏膜，覆盖于鼻腔表面，黏膜下方为软骨、骨或骨骼肌。成纤维细胞是结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传3代左右
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔鼻黏膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
CM-R099大鼠表皮黑色素细胞培养基100mL | AQP0： 水通道蛋白0抗体 0.1ml |
Anti-HPV18 E6 人类状瘤病毒18 E6抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh AANAT 芳香胺N-乙酰化转移酶抗体 规格 0.2ml |
Anti-CBX3/FITC 荧光素标记染色盒同源物3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ICAD/DFF-45 Beta Caspase激活的脱氧核糖核酸酶抑制剂抗体 规格 0.1ml |
Apelin 脂肪炎症因子Apelin抗原 0.5mg | HIF 2 alpha： 缺氧诱导因子2α /HIF-2α抗体 0.1ml |
IgG/Gold 胶体金标记的羊抗小鼠IgG 0.5ml | Rhesus antibody Rh FAIM1 FAS凋亡抑制分子1抗体 规格 0.2ml |
Saos-2，人成骨肉瘤细胞 | 猫源细胞 |
杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7B5 小鼠表皮角质形成细胞培养基 100mL | BRL 3A, 大鼠肝正常细胞 Rattus |
大鼠元细胞培养基 100mL | IFNA14 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (Fc 标签) |
HBL-100 人整合 SV40基因的上皮细胞 | Calu-6(人肺退行性癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
OK负鼠肾细胞 OK opossum kidney cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS | 兔鼻黏膜成纤维原代细胞Rhesus antibody Rh ICAD/DFF-45 Beta Caspase激活的脱氧核糖核酸酶抑制剂抗体 规格 0.1ml |
VEGFC Protein Rat 重组大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 标签) | AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人细胞裂解液 (阳性对照) |
H9c2细胞，大鼠心肌细胞 人肝癌细胞,HepG2/2-15细胞 CL-0128JeKo-1(人套细胞淋巴瘤细胞)5×106cells/瓶×2 | 人淋巴成纤维细胞HLF |
MN-c, 小鼠皮质元 | Rhesus antibody Rh sIgA/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗人分泌型IgA 规格 0.1ml |
ON(Mouse osteonectin) ELISA Kit 小鼠骨粘连蛋白 96T | 615小鼠网织细胞性白血病瘤株;L615 |
ChRM3 peptide 毒蕈碱型乙酰受体M3抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg | E3(Human Estriol) ELISA Kit 人雌三醇Multi-class antibodies规格： 48T |
Mast Cell Chymase： 肥大细胞类白酶1抗体 0.1ml | Saos-2，人成骨肉瘤细胞 |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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