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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
实验室分离的鸡主动脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的鸡主动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 鸡主动脉平滑肌原代细胞 | 组织来源 | 主动脉 |
英文名称 | Chicken Aortic Smooth Muscle Cells | 货号 | YS-01X8286 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
鸡主动脉平滑肌细胞分离自主动脉组织；主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为：升主动脉起于左心室，至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓，弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉；在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉，以上为胸主动脉，至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉；髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发生、发展中具有重要作用，以主动脉平滑肌细胞为实验研究对象，探讨心血管疾病相关发病机制是目前研究的热点；体外培养的主动脉平滑肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传3代左右
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
鸡主动脉平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
猕猴皮肤细胞;MMS7 人淋巴胚胎性癌细胞，Cates-1B细胞 MDA-MB-453(癌细胞) | Orexin A(Human Orexin A) ELISA Kit 人阿立新A 96T |
RASGEF1A： 核苷酸交换因子rasgef1a抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh APC APC标记的兔抗亲和素 规格 0.1ml |
Anti-HA tag/HRP 辣根过氧化物酶标记HA tag标签抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | C16orf57： 16号染色体开放阅读框57抗体 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BTBD19 BTB/POZ结构域蛋白19抗体 规格 0.2ml | Anti-CRHR1/CRFR1/FITC 荧光素标记促肾上腺皮质释放激素受体1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
兔抗人鸟苷三0酸酶-发动蛋白2抗体 Anti-Dynamin 2 0.1ml | ATG4D： 自噬相关蛋白4D抗体 0.2ml |
黑人Butt淋巴瘤细胞;RAJI | 人肾成纤维细胞培养基 100mL |
P19细胞，小鼠畸胎瘤细胞 MCF7(癌细胞) 人横纹肌肉瘤细胞;A-204 | CCL5 Protein Human 重组人 CCL5 / RAES 蛋白 (His & mucin 标签) |
双位点HC-kit受体细胞株;DMF7 | Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 Mouse |
小肠血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) | CL-0026ARPE-19(人视网膜上皮细胞)5×106cells/瓶×2 |
大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1) 胶质瘤细胞，SHG-44细胞 W6/32细胞，小鼠B细胞杂交瘤细胞 | 鸡主动脉平滑肌原代细胞C16orf57： 16号染色体开放阅读框57抗体 0.2ml |
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1 | 人细胞;Hela P10s-11F 大鼠血管外膜成纤维细胞培养基 100mL |
Promocell C-27417 Preadipocyte Growth Medium KIT, 前脂肪细胞生长培养基套装 500ml | NCI-H1688(人典型小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
小肠隐窝上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) | IgG/FITC FITC标记的兔抗长爪沙鼠IgG 0.3ml |
Rhesus antibody Rh H1N1 Hemagglutinin 2 甲型流感病毒血凝素抗体 规格 0.1ml | 人脐静脉内皮细胞;HUV-EC |
ENTPD2： CD39样蛋白1抗体 0.2ml | Anti-LIR-6 白细胞免疫球蛋白样受体6抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml |
A Beta1-40(Mouse amyloid beta peptide 1-40) ELISA Kit 小鼠β淀粉样蛋白Multi-class antibodies规格： 48T | 黑人Butt淋巴瘤细胞;RAJI |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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