详细介绍
鸡主动脉内皮原代细胞
鸡主动脉内皮细胞分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉内皮细胞是覆盖在主动脉内面的单层细胞,可分泌一系列血管活性物质而保持血管稳态,当其受到炎症或其它因素刺激后稳态被破坏而导致一些心血管疾病的发生。因此,主动脉内皮细胞已成为研究心血管疾病发病机制及治疗药物的工具。内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞,由一层扁平细胞所组成。它形成血管的内壁,是血管管腔内血液及其他血管壁(单层鳞状上皮)的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统,由心脏直至小的微血管。
英文名称 | Chicken Aortic Endothelial Cells | 组织来源 | 动脉 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X8285 |
细胞形态 | 内皮细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:鸡主动脉内皮细胞
组织来源:动脉
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
鸡主动脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的鸡主动脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的鸡主动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
长尾绿猴肾细胞;4647 | Nuclear Pore Complex Proteins: 核孔复合体蛋白抗体 0.2ml |
Rhesus antibody Rh MK1/MAPKK1/MKK1 MK1/MAPKK1抗体(N-端) 规格 0.1ml | Anti-t-PA/FITC 荧光素标记组织型纤溶酶原激活剂抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) 坏死因子相关凋亡诱导配体/凋亡素2配体抗原 0.5mg | Anti-NSBP1 核小体结合蛋白1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
Anti-Phospho-FoxO3a (Ser253) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠叉头蛋白3A抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLY 2型猪链球菌溶血素抗体 规格 1ml |
Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha (Tyr754) /FITC 荧光素标记0酸化血小板源性生长因子受体-α抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-phospho-APP(phospho Thr668) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠0酸化APP淀粉样肽前体蛋白(p-APP Thr668)抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
IL21 Others Rat 大鼠 IL21 / Ierleukin 21 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | INHBB Others Human 人 Activin B 人细胞裂解液 (阳性对照) |
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38] | FCRL1 Others Mouse 小鼠 FCRL1 / FCRH1 人细胞裂解液 (阳性对照) |
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0903 新生儿表皮角化细胞培养基 100mL | Spike Others MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
EFNB2 Others Human 人 EphrinB2 / EFNB2 人细胞裂解液 (阳性对照) | TGFB1 Others Human 人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 CHO细胞裂解液 (阳性对照) |
成纤维细胞培养基FM-acf | 鸡主动脉内皮原代细胞Anti-NSBP1 核小体结合蛋白1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
ACO2 Others Mouse 小鼠 ACO2 / Aconitase 2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 4T1 小鼠癌细胞 |
脑膜细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) | BGC823(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M014小鼠气管和支气管上皮细胞培养基100mL 人急性早幼粒白血病细胞;HL-60 |
MEG-01细胞,人成巨核细胞白血病细胞 正常小鼠Leydig细胞,TM3细胞 间充质干细胞生长添加物MSCGS | GPSM2: G蛋白信号调节蛋白2抗体 0.2ml |
TCR(Human T cell receptor) ELISA Kit 人T细胞受体Multi-class antibodies规格: 48T | PSG6 Others Human 人 PSG6 / PSG10 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
端粒体复制结合因子1抗体 Anti-TRBF1 1ml | 6-keto-PGF1a(Human 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 人6酮前列腺素F1a 96T |
AIMP3: 抑癌蛋白AIMP3抗体 0.2ml | IL21 Others Rat 大鼠 IL21 / Ierleukin 21 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。