详细介绍
鸡小肠黏膜上皮原代细胞
鸡小肠黏膜上皮细胞分离自小肠组织;小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的,因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后,基本上完成了消化过程,同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,粘膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切;构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似,接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似,绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短,不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能,其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力,促使食物向下运动。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障,持续暴露于大量抗原中,也是机体面对病原微生物的第一道防线。因此,肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外,在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞,在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用,它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。
英文名称 | Chicken Small Intestine Mucosal Epithelial Cells | 组织来源 | 小肠组织 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X7039 |
细胞形态 | 上皮细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:鸡小肠黏膜上皮细胞
组织来源:小肠组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介
公司实验室分离的鸡小肠黏膜上皮采用蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的鸡小肠黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
真皮成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) | Anti-Transferrin 转铁蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
HAase(Human Hyaluronidase) ELISA Kit 人透明质酸酶 96T | Anti-MIP4/CCL18/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎症蛋白4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TM4SF3 TM4SF3蛋白抗体 规格 0.2ml | MPO(Human myeloperoxidase) ELISA Kit 人髓过氧化物酶Multi-class antibodies规格: 48T |
HMGCR: 三羟基基还原酶抗体 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDCNL 卷曲螺旋结构域蛋白NL抗体 规格 0.2ml |
FBXL15: FBXL15蛋白抗体 0.2ml | bFGF-6 ELISA Kit 大鼠碱性成纤维细胞生长因子6Multi-class antibodies规格: 48T |
CD46 Others Human 人 CD46 人细胞裂解液 (阳性对照) | 大鼠海马趾细胞(RHh)(1×106) WM451, 人黑色素瘤细胞 Human |
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38] | PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人细胞裂解液 (阳性对照) |
HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人细胞裂解液 (阳性对照) | IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人细胞裂解液 (阳性对照) |
HUVEC-c 单一来源的人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 500,000cells 表皮角化细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) | OMD Others Mouse 小鼠 OMD / Osteomodulin 人细胞裂解液 (阳性对照) |
成纤维细胞培养基FM-sf | 鸡小肠黏膜上皮原代细胞MPO(Human myeloperoxidase) ELISA Kit 人髓过氧化物酶Multi-class antibodies规格: 48T |
FLT3 Others Human 人 FLT3 / FLK2 / CD135 人细胞裂解液 (阳性对照) | 人肝窦内皮细胞培养基 100mL |
TM3(小鼠间质细胞) 5×106cells/瓶×2 | 恒河猴肾细胞;MMK2 人脑星型胶质瘤细胞,SW 1088[SW-1088;SW1088]细胞 T-47D(管癌细胞) |
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A1) Heteroimer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-Phospho-Rb (Ser608) /FITC 荧光素标记0酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
O-GlcNAc transferase: O位N-乙酰葡萄糖胺OGT抗体 0.2ml | CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人细胞裂解液 (阳性对照) |
SRD5A2: 类固醇5α还原酶2抗体 0.1ml | CCP: 瓜酸环肽抗体 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Cy5 Cy5标记的驴抗兔IgG 规格 0.1ml | CD46 Others Human 人 CD46 人细胞裂解液 (阳性对照) |
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。