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详细介绍
鸡胚成纤维原代细胞
鸡胚成纤维细胞分离自胚胎；成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚胎成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞常用作ES细胞培养常用的饲养层细胞，能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES细胞增殖的因子，故能有效地促进ES细胞的增殖并维持其未分化特性和多潜能性，且分泌效果优于外源添加的一些因子，而且可以为ES细胞的培养提供类似于体内的微环境，故在研究哺乳动物ES细胞中得到广泛使用。
英文名称 | Chicken Embryo Fibroblast Cells | 组织来源 | 胚胎组织 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X7016 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称：鸡胚成纤维细胞
组织来源：胚胎组织
产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介
公司实验室分离的鸡胚成纤维采用消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的鸡胚成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
SK-MEL-1, 人皮肤黑色素瘤细胞 白血病细胞,CEM细胞 SW579(人甲状腺癌细胞) | ASMA ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗体 96T |
RNF45： 环指蛋白45/自分泌运动因子受体抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh Cy3 Cy3标记的兔抗亲和素 规格 0.1ml |
Anti-Haase/FITC 荧光素标记透明质酸酶/抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | C3orf49： 3号染色体开放阅读框49抗体 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BTBD6 BTBD6蛋白抗体 规格 0.2ml | Anti-CRF/FITC 荧光素标记促肾上腺皮质激素释放因子IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
精神分裂症易感基因抗体 Anti-DTNBP1 1ml | Aldolase C： 醛缩酶C抗体 0.2ml |
小鼠胚胎成纤维细胞;MEF | HEC-1-B 人子宫内膜腺癌细胞 |
ACHN人肾细胞腺癌细胞 ACHN human renal cell carcinoma cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS | TNF Protein Mouse 重组小鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白 |
CL-0187PK-15(猪肾细胞)5×106cells/瓶×2 | PC-12(高分化) 大鼠肾上腺嗜鉻细胞瘤细胞(高分化) |
T-105AIII型胶原酶(含10mL酶解缓冲液)1mL | CL-0023Ana-1(小鼠巨噬细胞)5×106cells/瓶×2 |
人结直肠腺癌细胞;HCT-15 [HCT15] 大鼠小胶质细胞培养基 100mL | 鸡胚成纤维原代细胞C3orf49： 3号染色体开放阅读框49抗体 0.2ml |
大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1 | BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1 小鼠成骨细胞培养基 100mL |
AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人细胞裂解液 (阳性对照) | 婆罗门牛皮肤成纤维样细胞;BOS-3 |
CM-H064人肾上皮细胞培养基100mL | IgG/Gold 胶体金标记的兔抗长爪沙鼠IgG 0.5ml |
Rhesus antibody Rh H1N1 Matrix Protein 1 A型病毒H1N1蛋白抗体 规格 1ml | 人脐静脉内皮细胞(人膀胱癌细胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304] |
FASN： 脂肪酸合成酶抗体 0.1ml | Anti-LIMK1 单丝蛋白激酶1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml |
ADP(Mouse adiponectin) ELISA Kit 小鼠脂联素Multi-class antibodies规格： 48T | 小鼠胚胎成纤维细胞;MEF |
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
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