化工仪器网
详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
公司实验室分离的鸡骨骼肌采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的鸡骨骼肌经α-Sarcometric actin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 鸡骨骼肌原代细胞 | 组织来源 | 骨骼肌组织 |
英文名称 | Chicken Skeletal Muscle Cells | 货号 | YS-01X7049 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
鸡骨骼肌细胞分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（Ⅰ带）及暗带（A带）。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞，细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方，细胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
HCC-9204细胞，肝癌细胞 人细胞,HeLa细胞 人角膜上皮细胞cDNAHCEpiC cDNA | beta-Amyloid 1-42 (CT)： β淀粉样肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗体 0.1ml |
Anti-phospho-HDAC7 (Ser318) 0酸化组蛋白去乙酰化酶7抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ACADS 酰基脱氢酶短链抗体 规格 0.2ml |
Anti-Caspase-3/RBITC 红色荧光素罗丹明标记(RBITC)Caspase-3 蛋白抗体(标记抗体)Multi-class antibodies规格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFN-β 干扰素β抗体 规格 0.1ml |
NGF-R(p75NTR) 生长因子受体(抗原) 0.5mg | HIV2 gp36： 人类免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp36抗体 0.1ml |
IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗马IgM 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM50B FAM50B蛋白抗体 规格 0.2ml |
非洲绿猴肾细胞;BS-C-1 | CM-H018人成纤维细胞培养基100mL |
HT-29细胞，人结肠腺癌细胞 人黑色素瘤细胞,HME7细胞 SV40T转化人脐静脉内皮细胞;PUMC-HUVEC-T1 | H4-IIE(大鼠肝癌细胞 ) 5×106cells/瓶×2 |
CL-0181P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2 | Acc-2(人涎腺腺样囊性癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
成骨细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) | IL22 Protein Human 重组人 IL22 / IL-22 / Ierleukin 22 蛋白 |
HR-8348细胞，直肠腺癌 人淋巴细胞瘤细胞,JK(Jurkat)细胞 人小细胞肺癌;NCI-H2227 | 鸡骨骼肌原代细胞Rhesus antibody Rh IFN-β 干扰素β抗体 规格 0.1ml |
HGF Protein Rat 重组大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 | CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) |
35.1杂交瘤细胞抗CD2 35.1 hybridoma cells against CD2 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 蛋白酶-EDTA(含100mL酶解缓冲液) 10mL |
EB病毒转化的人B淋巴细胞;Mao | Rhesus antibody Rh IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗水貂IgG 规格 0.1ml |
NOS ELISA Kit 大鼠合成酶 96T | FO 小鼠骨髓瘤细胞 |
rDen-2(rh-Dengue Virus) 重组人登革热病毒2型诊断抗原Multi-class antibodies规格： 100ug | aGT(Human angiotensinogen) ELISA Kit 人血管紧张素原Multi-class antibodies规格： 48T |
MDMX： MDM2样P53蛋白结合抗体 0.1ml | 非洲绿猴肾细胞;BS-C-1 |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
化工仪器网