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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
公司实验室分离的鸡肺动脉平滑肌采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的鸡肺动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 鸡肺动脉平滑肌原代细胞 | 组织来源 | 肺动脉组织 |
英文名称 | Chicken Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells | 货号 | YS-01X7010 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
鸡肺动脉成纤维细胞分离自肺动脉组织；肺动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中，把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉，经肺门入肺。肺动脉干位于心包内，为一粗短的动脉干。起自右心室，在升主动脉前方向左后上方斜行，至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。左肺动脉较短，在左主支气管前方横行，分二支进入左肺上、下叶。右肺动脉较长而粗，经升主动脉和上腔静脉后方向右横行，至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺动脉成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺动脉成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持肺动脉的正常形态；合成和释放细胞外基质；组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
Tsu-Pr1细胞，非雄激素依赖型前列腺癌 人子宫内膜腺癌细胞,KLE细胞 心脏微血管内皮细胞cDNAHCMEC cDNA | NF-KapB p65 ELISA Kit 大鼠核因子κB亚基p65亲和肽 96T |
ROR alpha： 维相关孤儿受体α抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh Cy5 Cy5标记的兔抗亲和素 规格 0.1ml |
Anti-H2AX/FITC 荧光素标记组蛋白H2AX抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | C1orf220： 1号染色体开放阅读框220抗体 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BTBD7 BTB/POZ结构域蛋白7抗体 规格 0.2ml | Anti-C-REL/FITC 荧光素标记淋巴细胞衍生C-型凝集素抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
死亡受体4抗体 Anti-DR4/APO2/TRAILR1 0.1ml | Aspartate Aminotransferase： 谷草转酶抗体 0.2ml |
非洲绿猴肾细胞;VERO | C57BL/6小鼠脂肪间质干细胞 C57BL/6 mouse adipose mesenchymal stem cells |
FBM细胞，胎儿骨髓间充质细胞 婴儿双歧杆菌 EB病毒转化的人B淋巴细胞(拉祜族);KM9406 | U14(小鼠子细胞) 5×106cells/瓶×2 |
弹(含10mL酶解缓冲液) 1mL | IL2 Protein Human 重组人 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白 |
胆道癌组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)/1ml | CL-0020Acc-2(人涎腺腺样囊性癌细胞)5×106cells/瓶×2 |
BxPc-3-EGFP-puro (慢病毒构建稳定株)人原位胰腺腺癌细胞 BxPc-3-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in situ pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycin | 鸡肺动脉平滑肌原代细胞C1orf220： 1号染色体开放阅读框220抗体 0.2ml |
大鼠肾小管上皮细胞RRTEpiC | Hep3B2.1-7细胞，人肝癌细胞 人髓母细胞瘤细胞,D341Med细胞 中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24 |
HFT-8810(人胎儿胸腺细胞株) 5×106cells/瓶×2 奇异变形杆菌 | IL21 Protein Canine 重组狗 IL21 / Ierleukin 21 蛋白 |
CL-0404NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 | IgG/Cy3 Cy3标记的兔抗长爪沙鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh H1N1 matrix protein 2 甲型流感病毒M2抗体 规格 0.2ml | 人脐动脉平滑肌细胞总RNAHUASMC NA |
ETS1 associated protein II： ETS1相关蛋白2抗体 0.1ml | Anti-Lingo-1 Nogo受体反应蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml |
HSP-70(Mouse Heat Shock Protein 70) ELISA Kit 小鼠热休克蛋白70Multi-class antibodies规格： 48T | 非洲绿猴肾细胞;VERO |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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