大鼠子宫平滑肌原代细胞

大鼠子宫平滑肌原代细胞

大鼠子宫平滑肌细胞分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。子宫肌层比较厚，由成束或成片的平滑肌组成，肌束间以结缔组织分隔。子宫平滑肌具有收缩功能，收缩受激素的调节，其收缩活动有助于精子向输卵管运送、经血排出以及胎儿娩出。子宫平滑肌层含有大量的血管，如果平滑肌层细胞过度生长，势必造成血管壁的增厚，管腔堵塞，体外培养平滑肌细胞有利于研究子宫和其他富含血管器官的血管形成机制。子宫平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。子宫平滑肌细胞的主要功能：①子宫平滑肌能保持子宫的基本形态，在孕期能大化的扩张子宫容积，保证胎儿孕育环境；②平滑肌细胞有收缩舒张能力，在生产时能形成生理性的缩腹环，推动胎儿向下移动，辅助生产。

产品名称：大鼠子宫平滑肌细胞

组织来源：子宫组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠子宫平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠子宫平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

大鼠线粒体甘油-3-0酸酰基转移酶(GPAM)试剂盒 ，英文名： GPAM ELISA Kit

Pla vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 植物K1(VK1)试剂盒

MouseImmunoglobulin,IgAELISAKit 小鼠免疫球蛋白A(IgA)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanAlphaLactalbumin,Alpha-LaELISAKit人α乳清蛋白

细胞HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定量PCR扩增试剂盒20次

ELISAKiths-CRP大鼠超敏C反应蛋白

小鼠骨保护素(OPG)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human orexin receptor (OXR) ELISA Kit 人食欲素受体(OXR)试剂盒

HumanPancreastatinELISAKit 人胰抑制素(Pancreastatin)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-scl70aibody,SCL70/topoⅠ试剂盒人抗硬皮病抗体70(SCL70/topoⅠ)试剂盒规格：96T/48T

植物细胞周期S期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒10次

Humanypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit人原激活肽(TAP)试剂盒规格：96T/48T

小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)试剂盒   96T/48T

小鼠内脏脂肪特异性丝酸蛋白酶抑制剂(vaspin)试剂盒   96T/48T

小鼠内皮脂肪酶(EL)试剂盒   96T/48T

小鼠内皮抑素(ES)试剂盒   96T/48T

SERPINB6B重组小鼠 Serpinb6b 蛋白 Protein

白介素12受体β2(IL2Rβ2)重组蛋白 Recombinant Interleukin 12 Receptor Beta 2 (IL12Rb2)

SAE1重组人 SAE1 蛋白 Protein

DPP10 Protein Human 重组人 DPP10 / DPRP3 蛋白

TNFSF4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 标签)

HA Others H5N2 甲型流感 H5N2 (A/osich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液   CRELD2 Others Mouse 小鼠 CRELD2 人细胞裂解液   JEC, 人子宫内膜腺癌细胞系 小鼠原代腹腔主动脉内皮细胞 小鼠原代视网膜muller细胞

大鼠子宫平滑肌原代细胞Isulin 胰岛素(抗原 0.5mgIsulin 胰岛素(抗原)

CD58 Protein Human 重组人 LFA-3 / CD58 蛋白 (Fc 标签)

FGFR4重组食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein

NAALADL1 Protein Mouse 重组小鼠 NAALADL1 蛋白

FAM3D重组人 FAM3D 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。