详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
细胞属性:
方法简介
公司实验室分离的大鼠子宫内膜基质采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠子宫内膜基质经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠子宫内膜基质原代细胞 | 组织来源 | 子宫组织 |
英文名称 | Rat Endometrial Stromal Cells | 货号 | YS-01X7682 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介:
大鼠子宫内膜基质细胞分离自子宫组织;子宫是孕育胎儿的器官,位于盆腔中部,膀胱与直肠之间,其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持,这些结构受损或松弛时,可以引起子宫脱垂。子宫内膜即黏膜,由上皮(属单层柱状上皮,有分泌细胞和纤毛细胞二种)和固有膜(由结缔组织构成,其内有大量的星形细胞,称为基质细胞)组成,子宫内膜可分为浅表的功能膜和深部的基底层,功能层较厚,约占内膜厚度的4/5;基底层较薄较致密,约占1/5,功能层可剥脱,而基底层不可剥脱。子宫内膜上皮细胞主要功能:①子宫内膜亦称子宫黏膜,是指构成哺乳类子宫内壁的一层;②子宫内膜对动情素和孕激素都起反应,因此可随着性周期(发情周期、月经周期)发生显著的变化。子宫内膜与胚胎附植密切相关,在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎与母体“对话"的过程中,子宫内膜上皮细胞充当了极其重要的角色。子宫内膜构成雌性哺乳动物子宫壁的内层,位于子宫腔面,在动物生殖生理活动中占有重要地位。子宫和子宫内膜是维持雌性动物生理功能和生育能力的重要器官,子宫内膜的再生修复是子宫的重要生理功能。体外培养的子宫内膜上皮细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品:
大鼠线粒体铁蛋白(FTMT)试剂盒 ,英文名: FTMT ELISA Kit
Pla vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 植物2(VD2)试剂盒
MouseImmunoglobulinM,IgMELISAKit 小鼠免疫球蛋白M(IgM)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanAmebiasisELISAKit人阿米巴
细胞HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定性试剂盒20次
ELISAKitE2大鼠雌二醇
小鼠热休克因子1(HSF1)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human brain naiuretic peptide / brain naiuretic peptide (BNP) ELISA Kit 人脑素/脑尿肽(BNP)试剂盒
HumanEsogen-inducedproteinpS2ELISAKit 人雌激素诱导蛋白PS2试剂盒 96T/48T 进口分装
guineapigIerferonγ,IFN-γ试剂盒豚鼠γ干扰素(IFN-γ)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量试剂盒20次
MouseCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit小鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)试剂盒规格:96T/48T
小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体试剂盒 小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体试剂盒、小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白试剂盒 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白试剂盒、小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠血小板衍生生长因子试剂盒 小鼠血小板衍生生长因子试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠血小板衍生生长因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠血小板衍生生长因子试剂盒、小鼠血小板衍生生长因子试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠胰岛素样生长因子试剂盒 小鼠胰岛素样生长因子试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠胰岛素样生长因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠胰岛素样生长因子试剂盒、小鼠胰岛素样生长因子试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
TFPI2重组小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白 (Fc 标签) Protein
胆囊收缩素(CCK)重组蛋白 Recombinant Cholecystokinin (CCK)
TNFRSF19重组人 TNFRSF19 / TROY 蛋白 Protein
DAPK1 Protein Human 重组人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 标签)
CTLA4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 CTLA4 / CD152 蛋白 (Fc 标签)
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 新生儿表皮角化细胞Many CD226 Others Mouse 小鼠 DNAM-1 / CD226 人细胞裂解液 小鼠原代肝kupffer细胞 小鼠原代胃黏膜上皮细胞
大鼠子宫内膜基质原代细胞AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(拟南芥 0.5mgAHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(拟南芥)
CD59 Protein Human 重组人 CD59 蛋白
ACE2重组小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein
CD34 Protein Rat 重组大鼠 CD34 蛋白 (Fc 标签)
MAX重组人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 标签) Protein
操作步骤:
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。