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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
公司实验室分离的大鼠子宫颈上皮采用先胶原酶消化、后组织贴块法，结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠子宫颈上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠子宫颈上皮原代细胞 | 组织来源 | 子宫组织 |
英文名称 | Rat Cervical Epithelial Cells | 货号 | YS-01X7203 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
大鼠子宫颈上皮细胞分离自子宫颈组织；子宫颈位于子宫下部，近似圆锥体，上端与子宫体相连，下端深入阴道。阴道顶端的穹隆又将子宫颈分为两部分：宫颈突入阴道的部分称宫颈阴道部，在阴道穹隆以上的部分称宫颈阴道上部。宫颈的中央为前后略扁的长梭性管腔，其上端通过宫颈内口与子宫腔相连，其下端通过宫颈外口开口于阴道。内外口之间即宫颈管。宫颈的大小与宫体比例随年龄及内分泌状态等而变化；宫颈壁由黏膜、肌层和外膜组成。子宫颈可有多种疾病，包括胚胎发育异常、炎症、瘤样病变、良性肿瘤、恶性肿瘤、损伤、宫颈性不孕、辅助生育技术、宫颈与性、宫颈妊娠等许多问题，体外培养的子宫颈上皮细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
大鼠腺苷A1受体(ADORA1)试剂盒 ，英文名： ADORA1 ELISA Kit
Pla vitamin C (VC) ELISA Kit 植物C(VC)试剂盒
Mousebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 小鼠脑素/脑尿肽(BNP)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanamyloidbetapeptide1-40,ABeta1-40ELISAKit人β淀粉样蛋白1-40
细胞HCK激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitE大鼠雌激素
小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human leishimaria aibody (Leishimaria Ab) ELISA Kit 人利什曼原虫抗体(Leishimaria Ab)试剂盒
HumanAi-Saccharomycescerevisiaeaibody,ASCAELISAKit 人抗酿酒酵母抗体(ASCA)试剂盒 96T/48T 进口分装
C4试剂盒鲑鱼补体蛋白4规格：96T/48T
鱼类组织元素比色法定量试剂盒20次
MouseInsulieceptorβ,ISR-βELISAKit小鼠胰岛素受体β(ISR-β)试剂盒规格：96T/48T
小鼠血小板相关抗体IgG 英文名称： platelet-associated aibody IgG 规格： 英文缩写： PAIgG
小鼠增殖细胞核抗原 英文名称： Proliferating Cell Nuclear Aigen 规格： 英文缩写： PCNA
小鼠血小板生长因子 英文名称： plateler-derived growth factor 规格： 英文缩写： PDGF
小鼠血小板源生长因子-BB 英文名称： plateler-derived growth factor BB 规格： 英文缩写： PDGF-BB
GRN重组人 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 Protein
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 CTLL-2(小鼠T细胞) IL13RA1 Others Mouse 小鼠 IL13Ra1 人细胞裂解液 小鼠原代肝窦内皮细胞 小鼠原代雪旺细胞
大鼠子宫颈上皮原代细胞内皮脂肪酶(LIPG)重组蛋白 Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)
CD5L Protein Human 重组人 CD5L / API6 蛋白
CTSL1重组人 Cathepsin L1 / CTSL1 蛋白 Protein
NP Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP
PILRA重组人 PILR-alpha / PILRA 蛋白 (Fc 标签) Protein
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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