大鼠滋养层干原代细胞

大鼠滋养层干原代细胞

大鼠滋养层干细胞分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。滋养层干细胞是胎盘组织细胞的祖细胞，与胚胎着床和胎盘的形成密切相关。胚胎着床和胎盘形成是母体与胎儿建立联系的关键时期，此时期滋养层细胞增殖速度快，滋养层干细胞自我更新和分化旺盛，与多种妊娠相关疾病的发生、发展及其增殖、功能调节的失常有密切关系。在哺乳动物胚胎发育过程中，胚胎细胞第一次分化形成内细胞团和滋养外胚层。滋养层干细胞是胎盘细胞的前体细胞，在胎盘发育中有重要作用。

产品名称：大鼠滋养层干细胞

组织来源：胎盘组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠滋养层干采用囊胚组织贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠滋养层干经HLA-E（白细胞抗原）免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

大鼠雄激素受体(AR)试剂盒 ，英文名： AR ELISA Kit

Mouse heat shock protein 20 (Hsp-20) ELISA Kit 小鼠热休克蛋白20(Hsp-20)试剂盒

MouseTissuefactor,IFELISAKit 小鼠组织因子(TF)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanai-typhusaibodyELISAKit人抗斑疹伤寒抗体

细胞ERK2激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitMCP-1/CCL2/MCAF大鼠单核细胞趋化蛋白1

小鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human growth hormone releasing factor (GH-RF) ELISA Kit 人生长激素释放因子(GH-RF)试剂盒

Humahymopein,TP-5ELISAKit 人五肽(TP-5)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-rubellavirusIgGaibody,ai-RVIgG试剂盒人抗风疹病毒IgG抗体(ai-RVIgG)试剂盒规格：96T/48T

植物细胞周期G1期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒10次

Humaubularbasememembraneaibogy,TBMELISAKit人抗肾小管基底膜抗体(TBM)试剂盒规格：96T/48T

小鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠上皮粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISAKit   ELISA. 

NTRK3重组人 TrkC / NTRK3 蛋白 Protein

性别决定区Y框蛋白2(SOX2)重组蛋白 Recombinant Sex Determining Region Y Box Protein 2 (SOX2)

ICAM5重组人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (ECD, His 标签) Protein

CD5 Protein Human 重组人 CD5 蛋白

Spike Protein SARS 重组SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 标签)

Gibco E071000 MesenPRO RS? Medium 含2%血清(New Zealand origin) 1 kit  LTEP-a-2(人肺腺癌细胞)     FOLR2 Others Human 人 FOLR2 / FBP 人细胞裂解液   人胚皮肤成纤维细胞;CCC-ESF-1  NCI-H716 小鼠原代睾丸支持细胞 大鼠原代睾丸支持细胞

大鼠滋养层干原代细胞HDAC1/HD1(histone deacetylase 1 0.5mgHDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 组织蛋白去乙酰化酶1抗原

EPHA2 Protein Human 重组人 EphA2 蛋白 (aa 585-976, His & GST 标签)

LCN2重组大鼠 LCN2 / NGAL 蛋白 Protein

CD79B Protein Mouse 重组小鼠 CD79B / B29 蛋白

DSC2重组人 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。