详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
细胞属性:
方法简介
公司实验室分离的大鼠脂肪间充质干采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠脂肪间充质干经CD90免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠脂肪间充质干原代细胞 | 组织来源 | 脂肪组织 |
英文名称 | Rat Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells | 货号 | YS-01X7592 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介:
大鼠脂肪间充质干细胞分离自脂肪组织;脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成,聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶;贮存的脂肪,在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸,经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应,参与多种重要病理生理过程;脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪组织中也存在一些干细胞群,具有自我更新能力和多向分化潜能,被称为脂肪组织来源的间充质干细胞,简称脂肪间充质干细胞。与骨髓间充质干细胞相比,在来源、细胞群特点以及分化潜能等多方面极为相似。但是,脂肪间充质干细胞更易获得足够数量的细胞,且获取过程中对机体损伤更小,是更为理想的自体干细胞源。脂肪组织分离得到脂肪间充质干细胞以梭形为主要形态,BrdU可标记其细胞核。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品:
大鼠血管生成素2(ANGPT2)试剂盒 ,英文名: ANGPT2 ELISA Kit
Mouse prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 小鼠前列腺特异性抗原(PSA)试剂盒
Mousemaixmetalloproteinase8/Neuophilcollagenase,MMP-8ELISAkit 小鼠基质金属蛋白酶8/粒细胞胶原酶(MMP-8)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanBeta-glucosidaseELISAKit人β葡糖苷酶
细胞DYRK1A激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitFASL大鼠凋亡相关因子配体
小鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)试剂盒
Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISAKit 人糖化蛋白(GSP)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanAlpha-fetoprotein,AFP试剂盒人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)试剂盒规格:96T/48T
植物半胱(cysteine)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次
Monkeyβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)试剂盒规格:96T/48T
小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)试剂盒 96T/48T
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)试剂盒 96T/48T
小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)试剂盒 96T/48T
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)试剂盒 96T/48T
SMAD3重组小鼠 Smad3 蛋白 (His & GST 标签) Protein
高迁移率族蛋白1(HMG1)重组蛋白 Recombinant High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
SHPK重组人 CARKL / SHPK 蛋白 Protein
FAM45A Protein Human 重组人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白
CD200R1L Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD200RLa 蛋白
GC-1, 鼠精原细胞 Mouse A2780(人癌细胞) 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A5 Hela-RFP-puro(慢病毒构建稳定株)人细胞 Hela-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human cervical cancer cells 小鼠原代骨骼肌细胞 小鼠原代小肠隐窝上皮细胞
大鼠脂肪间充质干原代细胞信号素5B(SEMA5B)重组蛋白 Recombinant Semaphorin 5B (SEMA5B)
CTLA4 Protein Human 重组人 CTLA4 / CD152 蛋白 (His & Fc 标签)
TREM1重组人 TREM1 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
LDLRAD3重组人 LDLRAD3 蛋白 (ECD, Fc 标签) Protein
操作步骤:
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。