大鼠支气管上皮原代细胞

大鼠支气管上皮原代细胞

大鼠支气管上皮细胞分离自支气管组织；支气管（Bronchi），是指由气管分出的各级分枝，由气管分出的一级支气管，即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较，前者较细长，走向倾斜；后者较粗短，走向较前者略直，所以经气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和气管还有以区别就是，气管是以“C"型的气管软骨为支架，而支气管不是。支气管上皮是气道与外界环境接触的第一道防线，不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞，还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子，从而参与气道炎症及免疫反应。支气管上皮细胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纤维化以及一些感染性呼吸道疾病的发病机制中均起着重要的作用。体外培养的原代支气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性，因此，在基础及临床研究中极为重要。

产品名称：大鼠支气管上皮细胞

组织来源：支气管组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠支气管上皮采用蛋白酶-蛋白酶混合消化法结合机械刮刷并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠支气管上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

大鼠血管生成素样蛋白1(ANGPTL1)试剂盒 ，英文名： ANGPTL1 ELISA Kit

Mouse prostaglandin F (PGF) ELISA Kit 小鼠前列腺素F(PGF)试剂盒

MouseStemCellFactorReceptor,SCFRELISAkit 小鼠干细胞因子受体(SCFR)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanBeta-Thromboglobulin,Beta-TGELISAKit人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白

细胞DNA损伤彗星荧光试剂盒20次

ELISAKitAZT大鼠

小鼠核因子kb(NF-kb)试剂盒 96T/48T

Rat ovalbumin specific IgE (OVA sIgE) ELISA Kit 大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)试剂盒

humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMABELISAKIT 人抗甲状腺微粒体抗体(ATMA/TMAB)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanAi-OvaryAibody,AOAb试剂盒人抗卵巢抗体(AOAb)试剂盒规格：96T/48T

植物高效液相色谱法定量试剂盒20次

Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit人酪激酶2(Tyk-2)试剂盒规格：96T/48T

小鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)试剂盒   96T/48T

小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)试剂盒   96T/48T

小鼠抗受体(A)试剂盒   96T/48T

小鼠抗Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)试剂盒   96T/48T

ERAP2重组人 LRAP / ERAP2 蛋白 Protein

血红素氧合酶1(HO1)重组蛋白 Recombinant Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)

HA重组甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

CD7 Protein Human 重组人 CD7 蛋白

GP120 Protein HIV 重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC)

GBC-SD(人胆囊癌细胞)   SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-7  小鼠胚胎成纤维细胞;BALB/C 3T3  Hela/DDP细胞，Hela细胞耐药亚株 人急性T淋巴母细胞白血病细胞,MOLT-4细胞 小鼠肺腺癌低转移细胞(VAP33- 小鼠原代骨髓单核细胞 人原代口腔黏膜上皮细胞

大鼠支气管上皮原代细胞Bursin 囊素三肽/三肽囊素/鸡法氏囊三肽 100mgBursin 囊素三肽/三肽囊素/鸡法氏囊三肽

CTNNB1 Protein Human 重组人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 标签)

CD36重组小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 Protein

NTRK1 Protein Rat 重组大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 标签)

CCL15重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 标签) Protein