大鼠真皮微血管内皮原代细胞

大鼠真皮微血管内皮原代细胞

大鼠真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织；真皮，位于表皮深层，向下与皮下组织相连，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维，使皮肤既有弹性，又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞（MEC）在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域，由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟，人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。与之相比，对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞，则因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限。

产品名称：大鼠真皮微血管内皮细胞

组织来源：皮肤组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠真皮微血管内皮采用胶原酶-蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠真皮微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

大鼠血管细胞粘附分子1(VCAM1)试剂盒 ，英文名： VCAM1 ELISA Kit

Mouse Glucose depende insulinoopic polypeptide (GIP) ELISA Kit 小鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)试剂盒

Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAkit 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)试剂盒 进口分装

CLIAKitforHumanCampylobacterJejuniPEB1ELISAKit人空肠弯曲菌黏附蛋白

细胞CSF1R激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitDA大鼠多巴胺

小鼠脑脊髓病毒(TMEV)试剂盒 96T/48T

Skin reactive factor / inflammatory factor (SRF/IF) ELISA Kit 人皮肤反应因子/性因子(SRF/IF)试剂盒

Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit 人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)试剂盒 96T/48T 进口分装

Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAA试剂盒人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)试剂盒规格：96T/48T

真菌NADPH氧化酶活性比色法定量试剂盒20次(10样本)

MouseAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit小鼠抗Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)试剂盒规格：96T/48T

小鼠抗内膜抗体(EMAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠解脲脲原体抗体(UU-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

POSTN重组小鼠 Periostin / POSTN 蛋白 Protein

Beta-Amyloid (1-42 0.1mgBeta-Amyloid (1-42) β淀粉样肽(1-42)

XCL2重组人 XCL2 蛋白 Protein

FAP Protein Human 重组人 FAP / Seprase 蛋白

CDH5 Protein Rat 重组大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白

FLRT1 Others Human 人 FLRT1 人细胞裂解液   人肾皮质上皮细胞HRCEpiC  CM-M025小鼠外周血白细胞原代平滑肌细胞特制基础Many types of cells包装：500/250/Mv 1 lu   貂肺上皮细胞 小鼠原代骨髓间充质干细胞 人原代睾丸支持细胞

大鼠真皮微血管内皮原代细胞PT141(Bremelanotide PT-141 1gPT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽

FSTL5 Protein Human 重组人 FSTL5 蛋白 (Fc 标签)

M1重组甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 标签)

RELT重组人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。