大鼠阴道平滑肌原代细胞

大鼠阴道平滑肌原代细胞

大鼠阴道平滑肌细胞分离自阴道组织；阴道位于膀胱、尿道和直肠之间，是一个富有弹性的管状器官。它在人类生殖过程中具有多种生理功能，是连接子宫与外阴的通道，是排出月经血、娩出婴儿的必经之路，也是一个重要的性交器官。阴道壁按组织学由外到内分三层，即黏膜层、肌层和外膜。平滑肌，是非横纹肌的肌肉组织。分布在人体动脉和静脉血管壁、膀胱、子宫、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫状肌和虹膜。阴道平滑肌分离自阴道壁肌层组织，平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

产品名称：大鼠阴道平滑肌细胞

组织来源：阴道组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠阴道平滑肌采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠阴道平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

大鼠血小板反应蛋白解整合素金属肽酶1(ADAMTS1)试剂盒 ，英文名： ADAMTS1 ELISA Kit

Mouse embryonic stem cell line MESPU30 (M30) ELISA Kit 小鼠胚胎干细胞系MESPU30(M30)试剂盒

MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISAkit 小鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanc-junELISAKit人c-jun

细胞CDK7/CYCLINH激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitCAMK2大鼠钙/钙调素依赖性蛋白激酶2

小鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat basic fibroblast growth factor (bFGF) ELISA Kit 大鼠碱性成纤维生长因子(bFGF)试剂盒

HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit 人复制蛋白A(RPA-70)试剂盒 96T/48T 进口分装

Human5-Nucleotidase,5-试剂盒人5核苷酸酶(5-)试剂盒规格：96T/48T

真菌天青曙红(Azure-eosinate)染色试剂盒50次

Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISAKit小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体(OMgp-Ab)试剂盒规格：96T/48T

豚鼠P物质   英文名称：   Guinea pig Substance P   规格：      英文缩写：   SP

豚鼠睾激素   英文名称：   Guinea pig Testosterone   规格：      英文缩写：   TESTO

豚鼠免疫球蛋白E   英文名称：   Immunoglobulin E   规格：      英文缩写：   IgE

豚鼠粘多糖   英文名称：   Mucopolysaccharide   规格：      英文缩写：   MLC

SELL重组食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein

MBP (Myelin Basic Protein, Rat 0.5mgMBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide 髓鞘碱性蛋白(多肽)大鼠

IFNL1重组人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 Protein

ERN1 Protein Human 重组人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977)

APOA1 Protein Mouse 重组小鼠 ApoA1 蛋白

FGF18 Protein Human 重组人 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 标签)  仓鼠卵巢细胞;Lec1 高转移卵巢癌细胞，HO-8910PM细胞 SCF细胞，白鲢尾鳍细胞  人脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C  CNE1细胞，人鼻咽癌细胞(高分化) 小鼠原代鼓膜上皮干细胞 兔原代下丘脑元细胞

大鼠阴道平滑肌原代细胞NF2/merlin(neurofibromatosis type 2 0.5mgNF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型纤维瘤抗原

GADD45G Protein Human 重组人 GADD45G / CR6 蛋白

LGMN重组野猪 Legumain / LGMN / AEP 蛋白 Protein

CCNE1 Protein Mouse 重组小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 标签)

TNFRSF8重组人 CD30 / TNFRSF8 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。