大鼠胰腺上皮原代细胞

大鼠胰腺上皮原代细胞

大鼠胰腺上皮细胞分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰腺干细胞在发育上被认为分离自内胚层胰腺上皮，在随后的胰腺发育过程中，胰腺干细胞分化为胰岛细胞（α、β、δ、PP细胞）、导管上皮细胞以及腺泡细胞。胰腺组织中还存在大量的间充质来源的细胞，包括成纤维细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞以及星形细胞，其中以成纤维细胞占主要部分。要离体分离培养获得胰腺上皮细胞就要排除间充质来源的细胞，尤其是成纤维细胞。目前常用的去除成纤维细胞方法有机械刮除法、消化以及胶原酶消化法等，胰腺上皮细胞的病变与急慢性胰腺炎的发生具有重大意义。

产品名称：大鼠胰腺上皮细胞

组织来源：胰腺组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠胰腺上皮采用胶原酶分次消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠胰腺上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

大鼠血小板因子4(PF4)试剂盒 ，英文名： PF4 ELISA Kit

Mouse coagulation factor VIII related aigen (F VIII -Ag) ELISA Kit 小鼠Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)试剂盒

Mousebasicfibroblastgrowthfactor9,bFGF-9ELISAKit 小鼠碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)试剂盒 进口分装

CLIAKitforHumanCollagenaseIELISAKit人胶原酶I

细胞CDK2/CYCLINE激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitHGF大鼠肝细胞生长因子

小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat prostaglandin E1 (PGE1) ELISA Kit 大鼠前列腺素E1(PGE1)试剂盒

Humancirculatingimmunecomplex,CICELISAKit 人循环免疫复合物(CIC)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2试剂盒人β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)试剂盒规格：96T/48T

植物总RNA化试剂盒(高多糖/酚)20次

HumanSurfactaProteinA，SP-AELISAKit人表面活性蛋白A(SP-A)试剂盒规格：96T/48T

兔子脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子组织因子(TF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子骨胶原交联(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子组织多肽抗原(TPA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

DDR1重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 Protein

C-型凝集素域家族11成员A(CLEC11A)重组蛋白 Recombinant C-Type Lectin Domain Family 11, Member A (CLEC11A)

BPIFA2重组人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 Protein

FABP1 Protein Human 重组人 L-FABP / FABP1 蛋白

FCGR3A Protein Rat 重组大鼠 CD16a / FCGR3A 蛋白

FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人细胞裂解液   AML-12小鼠正常肝细胞 Normal liver cells of AML-12 mice DMEM+10%FBS  CHIT1 Others Human 人 CHIT1 / Chitinase-1 人细胞裂解液 小鼠原代海马元细胞 小鼠原代内皮祖细胞

大鼠胰腺上皮原代细胞天冬转氨酶(AST)重组蛋白 Recombinant Aspartate Aminotransferase (AST)

CPM Protein Human 重组人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白

MCAM重组人 CD146 / MCAM 蛋白 (Fc 标签) Protein

HA Protein H5N2 重组甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

PEBP1重组人 PEBP1 / Phosphatidylethanolamine binding protein 1 蛋白 Protein