大鼠胰岛β原代细胞

大鼠胰岛β原代细胞

大鼠胰岛β细胞分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌素，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰岛β细胞，即胰岛B细胞，是胰岛细胞的一种，属内分泌细胞的一种，能分泌胰岛素，与胰岛α细胞分泌的胰高血糖素一起起到调节血糖的作用。胰岛B细胞功能受损、胰岛素分泌绝对或相对不足（胰岛素抵抗），会使血糖升高，从而引发糖尿病。而胰岛B细胞癌变会生成胰岛素瘤，引起恶性血糖降低症状。

产品名称：大鼠胰岛β细胞

组织来源：胰腺组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠胰岛β采用先用胶原酶消化分离得到胰岛、再用酶逐级消化胰岛制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠胰岛β经Insulin含量检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

大鼠氧化酶(DAO)试剂盒 ，英文名： DAO ELISA Kit

Porcine coisol (Coisol) ELISA Kit 猪(Coisol)试剂盒

特定基因序列(Deer)核酸试剂盒 48T

CLIAKitforM2-PK(HumanPyruvateKinase)ELISAKit人同酸激酶M2型同工酶

体液总胆汁酸酶连续循环比色法定量试剂盒20次

ELISAKitACAC鸡乙酰乙酸检测

小鼠苯(LPA)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human general anscription complex (GTC) ELISA Kit 人通用转录复合体(GTC)试剂盒

HumanCyclin-dependekinase4,CDK-4ELISAKit 人周期素依赖性激酶4(CDK-4)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanbreastcancersusceptibilityprotein1,BRCA-1试剂盒人癌易感蛋白1(BRCA-1)试剂盒规格：96T/48T

植物组织细胞核高分离试剂盒10次

HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit人特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)试剂盒规格：96T/48T

兔子细胞间粘附分子2试剂盒   兔子细胞间粘附分子2试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子细胞间粘附分子2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：兔子细胞间粘附分子2试剂盒、兔子细胞间粘附分子2eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

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兔子脱氧酚试剂盒   兔子脱氧酚试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子脱氧酚试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：兔子脱氧酚试剂盒、兔子脱氧酚eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

猪氧化酶试剂盒   猪氧化酶试剂盒   规格型号：96T/48T   猪氧化酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪氧化酶试剂盒、猪氧化酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

HA重组甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

pre S1/S2 protein [HBV] 乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2(抗原 0.5mgpre S1/S2 protein [HBV] 乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2(抗原)

AKT1重组人 AKT1 / PKB / PKBα 蛋白 Protein

CTF1 Protein Human 重组人 Cardiotrophin-1 / CTF1 蛋白 (Fc 标签)

DPP7 Protein Human 重组人 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白

FAM3D Others Human 人 FAM3D 人细胞裂解液   CEM细胞，白血病细胞 人前列腺癌细胞,PC-3M细胞 人肝内胆管上皮细胞总RNAHIBEpiC NA  肺大静脉内皮细胞Many   中国仓鼠卵巢细胞系;pDSr a2-mpl-X 小鼠原代颌骨骨髓间充质干细胞 大鼠原代乳腺导管上皮细胞

大鼠胰岛β原代细胞Gelsolin 凝溶胶蛋白抗原 0.5mgGelsolin 凝溶胶蛋白抗原

FCGR2B Protein Human 重组人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His 标签)

CHODL重组大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白  Protein

BLMH Protein Mouse 重组小鼠 BLMH / Bleomycin Hydrolase 蛋白 (His 标签)

FH重组人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白 (His 标签) Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。