大鼠羊膜上皮原代细胞

大鼠羊膜上皮原代细胞

大鼠羊膜上皮细胞分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。羊膜是胎盘的内层，与眼结膜组织结构相似，含有眼表上皮细胞，包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质，其光滑，无血管、及淋巴，具有一定的弹性；在电镜下，其分为五层：上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层，羊膜基底膜和羊膜羊膜基质层含有大量不同的胶元，主要为Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成，均具有多分化潜能，可转化为元，且还有合成、释放生物活性物质和营养因子的功能。

产品名称：大鼠羊膜上皮细胞

组织来源：胎盘组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠羊膜上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠羊膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

大鼠氧化酶(XOD)试剂盒 ，英文名： XOD ELISA Kit

Rabbit oponin I (Tn- I) ELISA Kit 兔肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)试剂盒

脑膜奈瑟菌C群(NM-C)核酸试剂盒 48T

CLIAKitforMouselymphocytefactorELISAKit小鼠淋巴细胞因子

体液过氧化氢(HYDROGENPEROXIDE)活性化学发光法定量试剂盒20次

ELISAKit2,3-DPG人2,3-二0酸甘油酸

小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA 试剂盒

Human aspaate aminoansferase / aspaate aminoansferase (GOT/GPT) ELISA Kit 人天门冬转氨酶/谷草转氨酶(GOT/GPT)试剂盒

Humanmitogenactivitedproteinkinase,MAPKELISAKit 人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)试剂盒 进口分装

Humanbrain-gpeptides,BGP/Gehrelin试剂盒人脑肠肽(BGP/Gehrelin)试剂盒

植物组织微粒体分离试剂盒20次

Humanspleeyrosinekinase,SykELISAKit人脾脏酪激酶(Syk)试剂盒

小鼠内皮型合成酶(eNOS)试剂盒   96T/48T

小鼠内皮素1(ET-1)试剂盒   96T/48T

小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)试剂盒   96T/48T

小鼠内毒素(ET)试剂盒   96T/48T

TREM1重组人 TREM1 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

信号素5B(SEMA5B)重组蛋白 Recombinant Semaphorin 5B (SEMA5B)

LDLRAD3重组人 LDLRAD3 蛋白 (ECD, Fc 标签) Protein

CTLA4 Protein Human 重组人 CTLA4 / CD152 蛋白 (His & Fc 标签)

F11 Others Human 人 F11 / FXI 人细胞裂解液   小鼠动脉内皮细胞   SERPINF2 Others Human 人 SerpinF2 / SERPINF2 人细胞裂解液   大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E  人胰腺腺泡上皮癌 小鼠原代颌下腺上皮细胞 大鼠原代前脂肪细胞

大鼠羊膜上皮原代细胞防御素β113(DEFβ113)重组蛋白 Recombinant Defensin Beta 113 (DEFb113)

CLIC4 Protein Human 重组人 CLIC4 蛋白

SEMA5A重组小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 Protein

FCGRT & B2M Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白

TSPAN8重组人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (Fc 标签) Protein