详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
细胞属性:
方法简介
公司实验室分离的大鼠外周血粒采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠外周血粒经瑞氏染色法,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠外周血中性粒原代细胞 | 组织来源 | 外周血 |
英文名称 | Rat Peripheral Blood Neutrophil Cells | 货号 | YS-01X7564 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介:
大鼠外周血粒细胞分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。白细胞是一类无色、球形、有核的血细胞。白细胞不是一个均一的细胞群,根据其形态、功能和来源部位可以分为三大类:粒细胞、单核细胞和淋巴细胞,其中粒细胞又可根据胞质中颗粒的染色性质不同,分为粒细胞、嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞三种。粒细胞是在瑞氏(Wright)染色血涂片中,胞质呈无色或极浅的淡红色,有许多弥散分布的细小的(0.2~0.4微米)浅红或浅紫色的颗粒。细胞核呈杆状或2~5分叶状,叶与叶间有细丝相连。粒细胞具趋化作用、吞噬作用和杀菌作用。粒细胞来源于骨髓,具有分叶形或杆状的核,胞浆内含有大量既不嗜碱也不嗜酸的细颗粒。这些颗粒多是溶酶体,内含髓过氧化酶、碱性磷酸酶和酸性水解酶等丰富的酶类,与细胞的吞噬和消化功能有关。粒细胞在血液的非特异性免疫中起着十分重要的作用,它处于机体抵御微生物病原体,特别是在化脓性细菌入侵的第一线,具有很强的吞噬活性,可吞噬细菌、衰老的红细胞、抗原一抗体复合物和坏死的细胞等。粒细胞内含有大量溶酶体酶,因此能将吞噬入细胞内的细菌和组织碎片分解。当粒细胞吞噬数十个细菌后,自身发生解体,所释出的各种溶酶体酶类能溶解周围组织而形成脓液。粒细胞是人体内寿命短的细胞,一般体外培养12-24h内活性稳定,48h活性下降,96h基本死亡。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 悬浮
细胞形态 圆形
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
操作步骤:
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
公司产品:
大鼠脂联素受体1(ADIPOR1)试剂盒 ,英文名: ADIPOR1 ELISA Kit
Mouse soluble endothelial protein C receptor (sEPCR) ELISA Kit 小鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)试剂盒
Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKIT 小鼠糖蛋白130(gp130)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanhistoneH2A-H2B-DNAaoaibodyELISAKit人抗组蛋白(H2A-H2B)-DNA抗体/抗二聚体-DNA抗体
B3高效液相色谱法定量试剂盒20次
ELISAKitCollagenaseI大鼠胶原酶I
小鼠高敏状腺原酸(u-T3)ELISA 试剂盒
Human eosinophil chemotactic protein Eotaxin 2 (Eotaxin 2/CCL24) ELISA Kit 人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)试剂盒
Humanβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit 人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)试剂盒 进口分装
Humanai-thymocyteglobulin,ATG试剂盒人抗细胞球蛋白(ATG)试剂盒
植物线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒20次
Humanansthyretin,TELISAKit人转甲状腺素蛋白(T)试剂盒
小鼠0酸甘油脱氢酶 英文名称: Mouse Glyceraldehyde 3 Phosphate Dehydrogenase3 规格: 英文缩写: GAPDH
小鼠5羟色胺 英文名称: Mouse 5 Hydroxyyptamine 规格: 英文缩写: 5HT
小鼠肝素糖蛋白 英文名称: Mouse Heparan Sulphate Proteoglycan 规格: 英文缩写: HSPG
小鼠乙型肝病毒表面抗体 英文名称: Mouse Hepatitis B surface Aibody 规格: 英文缩写: HBsAb
ACVRL1重组人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (Fc 标签) Protein
角蛋白19(KRT19)重组蛋白 Recombinant Keratin 19 (KRT19)
CLEC7A重组人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 蛋白 Protein
CR2 Protein Human 重组人 CD21 / CR2 / C3DR 蛋白
HA Protein H7N2 重组甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
DNASE1 Others Human 人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 人细胞裂解液 BHK-21(仓鼠细胞) QGY-7701, 人肝癌细胞 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 小鼠原代毛囊角质细胞 人原代结直肠癌相关成纤维细胞
大鼠外周血中性粒原代细胞Somatostatin/GRIH 抗原 0.5mgSomatostatin/GRIH 抗原
CSF2 Protein Human 重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白
TMEM25重组人 TMEM25 蛋白 Protein
PIGR Protein Human 重组人 PIGR 蛋白 (365 Ser/Gly, His 标签)
EFNB2重组人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 标签) Protein