详细介绍
大鼠外周血树突状原代细胞(成熟DC细胞)
大鼠外周血DC细胞分离自外周血,由外周血单核细胞诱导而成的;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞,典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落,细胞大而形态不规则,表面皱褶多,亦可见少量短刺状突,胞内细胞器丰富并可见吞噬泡,具有较强的迁移能力,伴随有部分未诱导成的单核细胞,贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成,多数呈悬浮生长, 细胞呈圆形,细胞体积进一步增大,表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 ),伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志,主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,进而激活T淋巴细胞,诱导免疫应答,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节;未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力,但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答,不能激活T细胞的第二信号,可导致T细胞无能,从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低,一般在30%以下。
英文名称 | Rat Peripheral Blood Maturation Dendritic Cells | 组织来源 | 外周血 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X8265 |
细胞形态 | 圆形,树突状 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:大鼠外周血树突状细胞(成熟DC细胞)
组织来源:外周血
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:半贴壁半悬浮
细胞形态:圆形,树突状
传代特性:属于高度分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠外周血树突状细胞(成熟DC细胞)体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的大鼠外周血成熟DC采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的大鼠外周血树突状经CD86免疫荧光鉴定、细 胞 形态等综合鉴定,纯度可达80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
大鼠脂素1(LPIN1)试剂盒 ,英文名: LPIN1 ELISA Kit
Mouse soluble leptin receptor (sLR) ELISA Kit 小鼠可溶性瘦素受体(sLR)试剂盒
MouseGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit 小鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforhumanHMGB-1ELISAKit人高迁移率族蛋白B1ELISAKit
B2高效液相色谱法定量试剂盒20次
ELISAKitGDNF大鼠胶质细胞系来源的营养因子
小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat maix metalloproteinase 9/ gelatinase B (MMP-9/G 大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/G
Humandeoxyribonucleicproteinaibody,DNP-AbELISAKit 人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)试剂盒 96T/48T 进口分装
Hamstermaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISAK仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/GelatinaseB)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母细胞染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒(包括抗体)10次
MouseBonemorphogeneticprotein2,BMP-2ELISAKit小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)试剂盒规格:96T/48T
小鼠可溶性细胞间粘附分子-1 英文名称: Soluble Iercellular Adhesion Molecule-1 规格: 英文缩写: sICAM-1
小鼠干扰素-α 英文名称: Ierferon α 规格: 英文缩写: IFN-α
小鼠干扰素-β 英文名称: Ierferon β 规格: 英文缩写: IFN-β
小鼠干扰素-γ 英文名称: Ierferon γ 规格: 英文缩写: IFN-γ
CD6重组小鼠 CD6 / TP120 蛋白 (Fc 标签) Protein
CD72分子(CD72)重组蛋白 Recombinant Cluster Of Differentiation 72 (CD72)
AZGP1重组人 Alpha-2-glycoprotein / AZGP1 蛋白 Protein
DAPK3 Protein Human 重组人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 标签)
CST3 Protein Rat 重组大鼠 Cystatin C / CST3 蛋白
DLD-1细胞,人结直肠腺癌上皮细胞 人视网膜母细胞瘤,Y79细胞 人导管癌细胞;ZR-75-30 SELPLG Others Mouse 小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人细胞裂解液 rCF, 大鼠心脏成纤维细胞 A4细胞 HL-7702(肝细胞) 小鼠原代脑动脉血管内皮细胞 大鼠原代肾脏巨噬细胞
大鼠外周血树突状原代细胞(成熟DC细胞)ORX-A(orexin-A 0.5mgORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原
CCL23 Protein Human 重组人 CCL23 / MIP 3 蛋白
EGF重组狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 Protein
FSTL1 Protein Mouse 重组小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 标签)
IFNG重组人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白 Protein
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。