大鼠外周血淋巴原代细胞

大鼠外周血淋巴原代细胞

大鼠外周血淋巴细胞分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。淋巴细胞（lymphocyte）是白细胞的一种，是体积小的白细胞。其由淋巴器官产生，主要存在于淋巴管中循环的淋巴液中，是机体免疫应答功能的重要细胞成分，是淋巴系统几乎全部免疫功能的主要执行者，是对抗外界感染和监控体内细胞变异的一线“士兵"。淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系，按其发生迁移、表面分子和功能的不同，可分为T淋巴细胞（又名T细胞）、B淋巴细胞（又名B细胞）和自然杀伤（NK）细胞。T细胞和B细胞都是抗原特异性淋巴细胞，它们的初来源是相同的，都来自造血组织。T淋巴细胞随血循环到胸腺，在胸腺激素等的作用下成熟，而B细胞在骨髓中分化成熟。当受抗原刺激后，T淋巴细胞即转化为淋巴母细胞，再分化为致敏T淋巴细胞，参与细胞免疫，其免疫功能主要是抗胞内感染、瘤细胞与异体细胞等；而B淋巴细胞是先转化为浆母细胞，再分化为浆细胞，产生并分泌免疫球蛋白（抗体），参与体液免疫，其功能是产生抗体，提呈抗原，以及分泌细胞内因子参与免疫调节；NK细胞不依赖抗原刺激而自发地发挥细胞毒效应，具有杀伤靶细胞的作用。

产品名称：大鼠外周血淋巴细胞

组织来源：血液组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 悬浮

细胞形态 圆形

传代特性 不增殖；不传代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠外周血淋巴采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠外周血淋巴经过检测，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

大鼠脂质运载蛋白1(LCN1)试剂盒 ，英文名： LCN1 ELISA Kit

Mouse soluble myosin heavy chain 2 (sMHC-2) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)试剂盒

MouseFractalkine,FKELISAKit 小鼠趋化因子(FK)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanHomocysteine(Hcy)ELISAKit人血浆同型半胱

B2比色法定量试剂盒20次

ELISAKitKAF大鼠角化细胞内分泌因子

小鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human thrombin receptor () ELISA Kit 人受体()试剂盒

Humansmallnuclearribonucleoprotein,sNP/SmELISAKit 人抗小核糖核蛋白/Sm抗体(sNP/Sm)试剂盒 96T/48T 进口分装

Hamstehyroxine-BindingGlobulinAssay,TBG试剂盒仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母氧化酶活性测定试剂盒20次

MouseBeta-naphthol,β-NphELISAKit小鼠β萘酚(β-Nph)试剂盒规格：96T/48T

小鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒   96T/48T

小鼠可溶性瘦素受体(sLR)试剂盒   96T/48T

小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)试剂盒   96T/48T

小鼠可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)试剂盒   96T/48T

SERPINA6重组小鼠 SerpinA6 / CBG 蛋白 Protein

ACE( ACE, testis-specific isoform precursor 0.5mgACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管紧张素转换酶(抗原)

FKBP7重组人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 标签) Protein

DAPK1 Protein Human 重组人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 标签)

LAMP1 Protein Rat 重组大鼠 LAMP1 / CD107a 蛋白 (Fc 标签)

DLD-1(人结肠腺癌细胞)   人APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株;7WML6.0 癌细胞，MDA-MB-453细胞 GIK细胞，草鱼肾细胞系  EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1036  MCF7细胞，癌细胞 人肝癌细胞,QGY-7701细胞 T-108B胶原酶 小鼠原代脑膜细胞 人原代阴道平滑肌细胞

大鼠外周血淋巴原代细胞STAT5(signal transducers and activators of transduction5 0.5mgSTAT5(signal transducers and activators of transduction5) 信号转导和转录激活因子5(STAT5)抗原

FZD10 Protein Human 重组人 Frizzled-10 / FZD10 蛋白

TBCB重组人 TBCB 蛋白 Protein

SLITRK1 Protein Human 重组人 SLITRK1 蛋白

YWHAB重组人 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 (GST 标签) Protein