大鼠胎盘间充质干原代细胞

大鼠胎盘间充质干原代细胞

大鼠胎盘间充质干细胞细胞分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。胎盘间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）是一种多能干细胞，是具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞像APSC多能细胞。在胚胎发育中来源于中胚层。在机体正常的组织损伤修复过程中，MSC是一种重要的参与组织再生的细胞库。在组织损伤引起的特殊信号作用下，MSC迁移到受损部位，在局部聚集增殖，依据不同的损伤信号沿着不同途径分化。MSC易于分离扩增，体外倍增能力旺盛，能保持其多向分化能力。因此，MSC是一种实用的组织修复种子细胞。相较于其他干细胞，胎盘间充质干细胞具有来源方便，细胞数量充足，易于分离、培养、扩增和纯化，传代扩增多代后仍具有干细胞特性。胎盘是干细胞的佳来源。

产品名称：大鼠胎盘间充质干细胞

组织来源：胎盘组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠胎盘间充质干采用-胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠胎盘间充质干经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

大鼠肿瘤坏死因子β(TNFβ)试剂盒 ，英文名： TNFβ ELISA Kit

Mouse soluble E selectin (sE-selectin) ELISA Kit 小鼠可溶性E选择素(sE-selectin)试剂盒

MouseEotaxin1ELISAKit 小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforhumanImmunoglobulinE,IgEELISAKitE

微型RNA(miRNA)文库构建技术试剂盒5次

ELISAKitM-CSF大鼠巨噬细胞集落刺激因子

小鼠Ⅸ(FⅨ)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human coagulation factor VIII related aigen (VIII -Ag) ELISA Kit 人Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)试剂盒

Humanenkephalin,ENKELISAKit 人脑啡肽(ENK)试剂盒 96T/48T 进口分装

Human17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCS试剂盒人17羟皮质类固醇(17-OHCS)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒20次

MouseAquaporin1,AQP-1ELISAKit小鼠水通道蛋白1(AQP-1)试剂盒规格：96T/48T

小鼠可溶性白细胞分化抗原86(B7-2/sCD86)试剂盒   96T/48T

小鼠可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)试剂盒   96T/48T

小鼠可溶性白细胞分化抗原30配体(sCD30L)试剂盒   96T/48T

小鼠可溶性白细胞分化抗原30(sCD30)试剂盒   96T/48T

RSV-G重组人类呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 蛋白 (93% Homology) Protein

TLR3 (Toll-like receptor 3 0.5mgTLR3 (Toll-like receptor 3) Toll样受体3抗原

GFPT1重组人 GFPT1 / GFAT 蛋白 Protein

CSF1 Protein Human 重组人 M-CSF / CSF-1 蛋白

SDF2 Protein Human 重组人 SDF2 蛋白

CXCL13 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 (His 标签)  C26瘤 结肠癌  小鼠胚胎成纤维细胞;MEF  SMMC-7721人肝癌细胞 SMMC-7721 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS  2. 皮肤细胞系统 小鼠原代胚胎成纤维细胞 小鼠原代皮肤成纤维细胞

大鼠胎盘间充质干原代细胞乳脂球表皮生长因子8(MFGE8)重组蛋白 Recombinant Milk Fat Globule EGF Factor 8 (MFGE8)

FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 标签)

EFNA5重组人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白  Protein

NS2 Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2

IL17F重组人 IL-17F / IL17F 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。