大鼠输尿管上皮原代细胞

大鼠输尿管上皮原代细胞

大鼠输尿管上皮细胞分离自输尿管组织；输尿管上接肾盂，下连膀胱，是一对细长的管道，呈扁圆柱状，位于腹膜后，为一肌肉粘膜所组成管状结构，沿腰大肌内侧的前方垂直下降进入骨盆。输尿管有三个狭窄部：一个在肾盂与输尿管移行处（输尿管起始处）；一个在越过小骨盆入口处；后一个在进入膀胱壁的内部。这些狭窄是结石、及坏死组织容易停留的部位。输尿管——膀胱连接处有一种特殊结构，即瓦耳代尔鞘，它能有效地防止膀胱内尿液返流到输尿管。临床上将输尿管分为上、中、下三段，也可称为腹段、盆段、膀胱段。其中，腹段自肾盂输尿管交界处，到跨越髂动脉处；盆段，自髂动脉到膀胱壁；膀胱段，自膀胱壁内斜行至膀胱粘膜、输尿管开口。输尿管管壁分为4层，黏膜层、固有层、肌层、外膜。黏膜层表面为移行上皮，约有4-5层细胞；固有层由细密的结缔组织构成，内含胶原纤维和少量弹性纤维；输尿管肌层主要由内纵和外环两层平滑肌组成；外膜为疏松结缔组织，营养血管由外膜进入输尿管。其中，输尿管上皮细胞主要分布于黏膜层。

产品名称：大鼠输尿管上皮细胞

组织来源：尿道组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠输尿管上皮采用先蛋白酶消化、然后机械分离法使输尿管分层、后胶原酶消化，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠输尿管上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

大鼠肿瘤坏死因子配体超家族成员12(TNFSF12)试剂盒 ，英文名： TNFSF12 ELISA Kit

Mouse soluble Endoglin (ENG/sCD105) ELISA Kit 小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)试剂盒

Mouseeosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 小鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanImmunoglobulinG,IgGELISAKitG

微型RNA(miRNA)文库构建技术服务1个样本

ELISAKitMDC/CCL22大鼠巨噬细胞来源的趋化因子

小鼠Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human coagulation factor IX (F IX) ELISA Kit 人Ⅸ(FⅨ)试剂盒

Humanlowmolecular-weightprotein/proteasomebeta-typesubunit,LMP7/PSMB9ELISAKit 人低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9(LMP7/PSMB9)试剂盒 96T/48T 进口分装

Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHP试剂盒人17羟孕同(17-OHP)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞线粒体损伤/氧化(NAO)荧光测定试剂盒20/200次

MouseAquaporin0,AQP-0ELISAKit小鼠水通道蛋白0(AQP-0)试剂盒规格：96T/48T

小鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠透明质酸(HA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

ROBO4重组小鼠 ROBO4 蛋白 Protein

白介素5(IL5)重组蛋白 Recombinant Interleukin 5 (IL5)

GABARAPL2重组人 GATE-16 / GABARAPL2 蛋白 Protein

CSF1 Protein Human 重组人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白

CD4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD4 蛋白

CXCL12 Protein Human 重组人 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 标签)  RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)     大鼠骨髓瘤细胞;Y3-Ag 1.2.3  Pt K1细胞，长鼻袋鼠肾细胞 人胰腺腺癌细胞,Panc 10.05细胞 小鼠原代皮肤成纤维细胞 大鼠原代肾集合管上皮细胞

大鼠输尿管上皮原代细胞抗增殖细胞核抗原(PCNA)重组蛋白 Recombinant Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA)

FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, Fc 标签)

CA9重组人 Carbonic Anhydrase IX / CA9 蛋白  Protein

HA Protein H7N2 重组甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

IL17A重组人 IL17 / IL17A 蛋白 Protein