大鼠视网膜神经节原代细胞

大鼠视网膜神经节原代细胞

大鼠视网膜节细胞分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、节细胞层、纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视乳头。视网膜上的感觉层是由三个元组成。第一元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处多。第二层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个节细胞相联系，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的纤维跨越视网膜表面，经由视到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力强。视网膜节细胞贴壁后呈单层排列，部分细胞聚集成团，细胞呈圆形或椭圆形，核圆且相对透明，有些细胞膜上伸出短而小的突起；该细胞为高度分化细胞，在体外属于不增殖群。视网膜节细胞是青光眼病理性损害的主要细胞，视网膜节细胞的死亡可导致视功能不可逆损伤，研究视网膜节细胞损害的细胞学和分子生物学机制有利于青光眼发病机制的研究。

产品名称：大鼠视网膜神经节细胞

组织来源：视网膜组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 元细胞样

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠视网膜节采用-胶原酶联合消化法，结合视网膜节细胞专用培养基培养和化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠视网膜节经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

大鼠重肽丝蛋白(NEFH)试剂盒 ，英文名： NEFH ELISA Kit

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Rat alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)试剂盒

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)试剂盒 96T/48T 进口分装

Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1试剂盒人16α羟基雌同1(16-αOHE-1)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒20次

MouseAquaporin2,AQP-2ELISAKit小鼠水通道蛋白2(AQP-2)试剂盒规格：96T/48T

小鼠CD3分子试剂盒   小鼠CD3分子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠CD3分子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠CD3分子试剂盒、小鼠CD3分子试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠β-防御素试剂盒   小鼠β-防御素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠β-防御素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠β-防御素试剂盒、小鼠β-防御素试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠肝病毒试剂盒   小鼠肝病毒试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠肝病毒试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠肝病毒试剂盒、小鼠肝病毒试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

猪流感病毒A试剂盒   猪流感病毒A试剂盒   规格型号：96T/48T   猪流感病毒A试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪流感病毒A试剂盒、猪流感病毒A 试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

PDGFRA重组大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白 Protein

CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase 0.5mgCYP450(Cytochrome P450 monooxygenase) 细胞色素P450单氧化酶(多肽抗原)

CCL21重组人 CCL21 / 6Ckine 蛋白 Protein

CSF1R Protein Human 重组人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & GST 标签)

SERPINA11 Protein Mouse 重组小鼠 SerpinA11 蛋白

CTLL-2细胞，T细胞 人胰腺癌细胞,JF-305细胞 CM-M016小鼠胰腺星状细胞FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人细胞裂解液   RSC, 大鼠雪旺细胞 NCYC 234[IPAZSC 148]细胞 COS-7(SV40 小鼠原代破骨细胞 兔原代牙髓干细胞

大鼠视网膜神经节原代细胞chloramphenicol/BSA 偶联牛血清白蛋白 2mgchloramphenicol/BSA 偶联牛血清白蛋白

CTRC Protein Human 重组人 CTRC / chymotrypsin C 蛋白

TNFRSF17重组小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (Fc 标签) Protein

SIGIRR Protein Mouse 重组小鼠 SIGIRR / TIR8 蛋白 (His & Fc 标签)

PGA4重组人 PGA4 / Pepsinogen A 蛋白 Protein