大鼠神经小胶质原代细胞

大鼠神经小胶质原代细胞

大鼠神经小胶质细胞分离自脑组织；大脑分左右两个半球，大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面，即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积)；半球表面有很多深浅不等的沟或裂，沟或裂之间的隆起叫回，它们大大增加了大脑的表面积；大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔，使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。小胶质细胞是神经胶质细胞的一种，相当于脑和脊髓中的巨噬细胞，是中枢神经系统(CNS)中的第一道也是最主要的一道免疫防线。小胶质细胞大约占大脑中的神经胶质细胞的20%，小胶质细胞不停地清除着中枢神经系统中的损坏的神经，斑块及感染性物质。无数临床上和理学研究表明激活的小胶质细胞在神经退化类疾病的发病机理中起到十分重要的作用，如帕金森病、多发性硬化和阿兹海默症等。但是过多激活或失控的小胶质细胞会引起神经毒性。它们是促炎因子和氧化应激的重要来源，如肿瘤坏死因子(TNF)，一氧化氮，白介素等有神经毒性的物质。神经小胶质细胞的主要功能：①神经胶质出现在大脑发育早期向成熟阶段转化的过程中；②当程序性细胞死亡时，或在大脑发育的过程中，中枢神经系统受损或受到病理损坏时，神经胶质可做为大脑的巨噬细胞；③胶质细胞能在Ⅱ类组织相容性复合体表达CD-4阳性T细胞时表达抗原，能进行Fc介导的巨噬作用，并且与造血细胞和巨噬细胞组织共享抗原。

产品名称：大鼠神经小胶质细胞

组织来源：脑组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 （12mM）

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠神经小胶质采用酶消化法结合差速贴壁法，在培养基营养缺失数天后经摇床震荡收集脱落细胞制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠神经小胶质经CD11b免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

大鼠组蛋白H2B(H2B)试剂盒 ，英文名： H2B ELISA Kit

Nude mouse alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)试剂盒

MouseProcalcitonin,PCTELISAKit 小鼠降钙素原(PCT)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit人淋巴细胞功能相关抗原3

土壤元素比色法定量试剂盒20次

ELISAKitAMA大鼠抗心肌抗体

豚鼠内皮素1(EDN1)试剂盒 ，英文名： EDN1 ELISA Kit

Human parathyroid hormone related peptide (PTHrp) ELISA Kit 人副甲状旁腺激素相关肽(PTHrp)试剂盒

rabbitImmunoglobulinA,IgAELISAKit 兔子免疫球蛋白A(IgA)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBALP(Humanbonealkalinephosphatase)ELISAKit人骨碱性0酸酶

线虫β-半乳糖苷酶化学发光定量试剂盒20次

RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit兔子Ⅱ(FⅡ)试剂盒规格：96T/48T

兔血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔补体蛋白3(C3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔p物质(SP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

FGFR3重组小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 Protein

CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator 0.5mgCD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B 和 T 淋巴细胞衰减蛋白(抗原)

VSTM1重组人 VSTM1 蛋白 (Fc 标签) Protein

HGF Protein Human 重组人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

PDCD1LG2 Protein Rat 重组大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白

COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞 人癌细胞，MCF7细胞 PT67(小鼠逆转录病毒包装细胞)  FRhK-4(恒河猴胚细胞)     NRK-52E，大鼠肾细胞 Sars蛋白表达株，293sars181A细胞 NCI-H1703 [H1703](人肺癌细胞) 小鼠原代神经胶质细胞 大鼠原代牙龈成纤维细胞

大鼠神经小胶质原代细胞TrK A (h-NGFR 0.5mgTrK A (h-NGFR) (p140- TrK A) 神经生长因子的一种(抗原)

GYPC Protein Human 重组人 GYPC / Glycophorin-C 蛋白

结晶紫染色液 100ml

NBL1 Protein Human 重组人 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白

CD226重组人 CD226 / DNAM-1 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。