大鼠神经干原代细胞

大鼠神经干原代细胞

大鼠神经干细胞分离自脑皮层组织；大脑分左右两个半球，大脑皮质（灰质）覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面，即外侧面（约占整个皮质面积的1/3）、内侧面和底面（占2/3的面积）；半球表面有很多深浅不等的沟或裂，沟或裂之间的隆起叫回，它们大大增加了大脑的表面积；大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔，使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。神经干细胞具有分化为神经神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力，能自我更新，并足以提供大量脑组织细胞的细胞群。神经干细胞是一类具有分裂潜能和自更新能力的母细胞，它可以通过不对等的分裂方式产生神经组织的各类细胞。需要强调的是，在脑脊髓等所有神经组织中，不同的神经干细胞类型产生的子代细胞种类不同，分布也不同。神经干细胞作为干细胞的一种，它具有其它所有干细胞的基本特征：具有自我维持和自我更新能力，具有多种分化潜能，具有分化为本系统大部分类型细胞的能力，这种自我更新和分化潜能可以维持相当长的时间甚至终生，对损伤和疾病具有反应能力。神经干细胞在疾病、损伤状态下具有增殖、迁移，并向神经细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的能力，已成为神经系统损伤修复和再生研究的热点，体外建立稳定的神经干细胞培养模型是其基础和临床应用的前提。神经干细胞在培养3-4d后，可形成神经球，神经球在培养基中呈悬浮生长，予以更换半量培基，1周后用吸管轻柔吹打球形克隆成为小的神经球和单细胞悬液，将部分细胞接种到新的培养瓶中，2×105个细胞/瓶，每7-10d传代1次，每隔3d离心更换半量培养基1次，培养条件不变。

产品名称：大鼠神经干细胞

组织来源：脑组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 悬浮

细胞形态 球形

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%，Accutase

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠神经干采用消化后差速贴壁，结合神经干细胞专用培养基培养筛选制备而来，总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠神经干经Nestin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

PLK1重组小鼠 PLK1 / PLK-1 蛋白 Protein

RNA结合基元蛋白20(RBM20)重组蛋白 Recombinant RNA Binding Motif Protein 20 (RBM20)

IZUMO1重组人 IZUMO1 蛋白 Protein

CDK16 Protein Human 重组人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 标签)

IL12A Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 标签)

小鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)试剂盒

Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盘蛋白(PP)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumancicaicialPemphigoid,CP试剂盒人瘢痕性天疱疮抗体(CP)试剂盒规格：96T/48T

组(leucine)含量比色法定量试剂盒20次

humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)试剂盒规格：96T/48T

小鼠铁蛋白试剂盒   小鼠铁蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠铁蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠铁蛋白试剂盒、小鼠铁蛋白试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒   小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒、小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠糖化   小鼠糖化   规格型号：96T/48T   小鼠糖化，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠糖化、小鼠糖化   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠髓过氧化物酶特异性抗粒细胞胞质抗体试剂盒   小鼠髓过氧化物酶特异性抗粒细胞胞质抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠髓过氧化物酶特异性抗粒细胞胞质抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠髓过氧化物酶特异性抗粒细胞胞质抗体试剂盒、小鼠髓过氧化物酶特异性抗粒细胞胞质抗体试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

ICAM1重组小鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

CCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted 0.5mgCCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted) 活化T细胞表达和分泌的调节因子抗原

UBE2F重组人 UBE2F 蛋白 Protein

HEXA Protein Human 重组人 Hexosaminidase A / HEXA 蛋白 (Subunit A, His 标签)

CSF1R Protein Rat 重组大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (Fc 标签)

COLO-320细胞，结肠腺癌细胞 直肠腺癌,HR-8348细胞 人巨细胞白血病细胞株;Mo7e  L129细胞，NCTC克隆929细胞 人Butt`s淋巴瘤细胞,Raji细胞 小鼠小胶质细胞;BV2  人间充质干细胞-肝 人肌肉成纤维细胞瘤 小鼠原代肾动脉平滑肌细胞 人原代颌下腺上皮细胞

大鼠神经干原代细胞Hpt/HP(haptoglobin 0.5mgHpt/HP(haptoglobin) 结合珠蛋白/触珠蛋白抗原

CFHR1 Protein Human 重组人 CFHR1 蛋白

SOST重组大鼠 Sclerostin / SOST 蛋白 Protein

MIF Protein Mouse 重组小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白

YES1重组人 c-Yes / YES1 蛋白 (His & GST 标签) Protein