大鼠软骨原代细胞

大鼠软骨原代细胞

大鼠软骨细胞分离自软骨组织；软骨组织由软骨细胞、基质及纤维构成。软骨组织再生能力强，这些增生的幼稚细胞形似纤维母细胞，以后逐渐变为软骨母细胞，并形成软骨基质，细胞被埋在软骨陷窝内而变为静止的软骨细胞。根据软骨组织内所含纤维成分的不同，可将软骨分为透明软骨、弹性软骨和纤维软骨三种，其中以透明软骨的分布较广，结构也较典型。软骨细胞（chondrocyte）位于软骨陷窝内。幼稚的软骨细胞位于软骨组织的表层，单个分布，体积较小，呈椭圆形，长轴与软骨表面平行，越向深层的软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形，染色浅，细胞质弱嗜碱性，常见数量不一的脂滴。成熟的软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内，这些软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成，称为同源细胞群。电镜下，软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中，软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

产品名称：大鼠软骨细胞

组织来源：软骨组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每3-4天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠软骨采用胶原酶-蛋白酶联合消化制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

大鼠组织蛋白酶L(CTSL)试剂盒 ，英文名： CTSL ELISA Kit

Mouse ai glucoprotein 210 (gp210) ELISA Kit 小鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)试剂盒

Mouseadrenomedullin,ADMELISAKit 小鼠肾上腺髓质素(ADM)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit人雷帕霉素靶蛋白

透射电镜(TEM)制片处理脱水液10毫升

ELISAKitACA大鼠抗粒/中心体抗体

小鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human dermatan sulfate (DS) ELISA Kit 人皮肤素(DS)试剂盒

HumanCpGoligodeoxynucleotide,CpG-ODNELISAKit 人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)试剂盒 96T/48T 进口分装

Chickehyroxine,T4试剂盒鸡甲状腺素(T4)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞PP2A蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit小鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)试剂盒规格：96T/48T

小鼠褪黑素   英文名称：   Mouse Melatonin   规格：      英文缩写：   MLT

小鼠金属硫蛋白   英文名称：   Mouse Metallothionein   规格：      英文缩写：   MET

小鼠尿微量白蛋白   英文名称：   Mouse Microalbunminuria   规格：      英文缩写：   MAU

小鼠黏膜选择素黏附分子1   英文名称：   Mouse Mucosal Vascular Addressin Cell Adhesion Molecule 1   规格：      英文缩写：   MADCAM-1

CM-R070大鼠尿道上皮细胞CM-M098小鼠内脏脂肪细胞DDR1 Others Human 人 DDR1 Kinase / CD167 (aa 444-913) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   CALU Others Human 人 CALU / Calumenin 人细胞裂解液 小鼠原代肾上腺皮质细胞 人原代肺微血管平滑肌细胞

CM-R078大鼠大隐静脉平滑肌细胞IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人细胞裂解液   CCL20 Others Mouse 小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   EFNB2 Others Rat 小鼠原代肾上皮细胞 小鼠原代腹腔主动脉外膜成纤维细胞

大鼠软骨原代细胞胎盘碱性0酸酶(ALPP)重组蛋白 Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)

HIST1H3A Protein Human 重组人 Histone H3.1 / HIST1H3A / H3FA 蛋白

KLK13重组人 KLK13 / Kallikrein-13 蛋白 Protein

HA Protein H11N2 重组甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

SEMA3A重组人 Semaphorin 3A / SEMA3A 蛋白 (Fc 标签) Protein