大鼠前脂肪原代细胞

大鼠前脂肪原代细胞

大鼠前脂肪细胞分离自脂肪组织；脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成，聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶；贮存的脂肪，在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸，经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应，参与多种重要病理生理过程；脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪组织在体内含有两种主要的细胞：一种是在胞浆内积聚脂滴的成熟脂肪细胞；另一种是虽未在胞浆内积聚脂滴但有这种潜能的前脂肪细胞。前脂肪细胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪细胞呈圆形，已经失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化前体细胞，与肥胖有着非常密切的关系。前脂肪细胞是一种类成纤维细胞，在演变的过程中不断吸收脂质，最终成为成熟的脂肪细胞。前脂肪细胞对外界机械损伤的抵抗力较强，可望成为软组织缺损的有益填充物。

产品名称：大鼠前脂肪细胞

组织来源：脂肪组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠前脂肪采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠前脂肪经油红O染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

人乙型肝病毒X抗原(HBxAg)ELISA 试剂盒

Human tissue polypeptide specific aigen (TPS) ELISA Kit 人组织多肽特异性抗原(TPS)试剂盒

HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1AbELISAKit 人血管紧张素Ⅱ受体1抗体(ATⅡR1)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanIerleukin4,IL-4试剂盒人白介素4(IL-4)试剂盒规格：96T/48T

组织亮(leucine)含量比色法定量试剂盒20次

HumanIerleukin23，IL-23ELISAKit人白介素23(IL-23)试剂盒规格：96T/48T

小鼠(VD)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat bone morphogenetic protein (BMPs) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白(BMPs)试剂盒

HumanProteindisulfide-isomeraseprecursor,PDIELISAKit 人蛋白二硫化物异构酶前体(PDI)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenLaminin,LN试剂盒鸡层连蛋白/板层素(LN)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞IP3R受体蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseGelsolinELISAKit小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)试剂盒规格：96T/48T

兔型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)试剂盒   96T/48T

兔型纤溶酶原激活物(uPA)试剂盒   96T/48T

兔内皮型合成酶(eNOS)试剂盒   96T/48T

兔内皮素（Endothelin-1）试剂盒   96T/48T

EDA2R重组小鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 标签) Protein

发动蛋白2(DNM2)重组蛋白 Recombinant Dynamin 2 (DNM2)

GADD45G重组人 GADD45G / CR6 蛋白 Protein

IL17F Protein Human 重组人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

IL23R Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 标签)

CM-R034大鼠肝动脉内皮细胞中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1  SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   PLAT Others Mouse 小鼠 tPA / PLAT 人细胞裂解液 小鼠原代肾小球内皮细胞 兔原代肾小球内皮细胞

大鼠前脂肪原代细胞Beta-Amyloid(1-28 0.5mgBeta-Amyloid(1-28) β淀粉样肽1-28(多肽蛋白)

ITGAX & ITGB2 Protein Human 重组人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白

ACVR2A重组小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

FZD4 Protein Rat 重组大鼠 Frizzled-4 / FZD4 蛋白 (Fc 标签)

NRG1重组人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 标签) Protein