大鼠前列腺微血管内皮原代细胞

大鼠前列腺微血管内皮原代细胞

大鼠前列腺微血管内皮细胞分离自前列腺组织；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成对的实质性器宫，由腺组织和肌组织构成。前列腺如栗子，底朝上，与膀胱相贴，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面贴耻骨联合，后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过，扼守着尿道上口，所以，前列腺有问题时，排尿首先受影响。前列腺是机体非常少有的，具有内、外双重分泌功能的性分泌腺。作为外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是构成精液主要成分；作为内分泌腺，前列腺分泌的激素称为“前列腺素"。微血管是极细微的血管，管径平均为6-9μm，连于动、静脉之间，互相连接成网状。微血管壁薄，管径较小，血流很慢，通透性大。其功能是利于血液与组织之间进行物质交换。其管壁主要由一层内皮细胞构成，在内皮外面有一薄层结缔组织。另外还常可见到一种扁而有突起的细胞贴在微血管的管壁外面，称为周细胞。每一次性活动都会造成前列腺的充血,促使微血管不断扩张而压迫腺体造成淤积，体外培养前列腺微血管内皮，对于研究前列腺炎症，炎症发生机理有重要的意义。

产品名称：大鼠前列腺微血管内皮细胞

组织来源：前列腺

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基：基础培养基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传1-2代；不建议多次传代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠前列腺微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的优良培养状态。

方法简介

实验室分离的大鼠前列腺微血管内皮采用胶原酶 - 蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法，最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的大鼠前列腺微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

人乙型肝病毒核心抗原(HBcAg) 试剂盒

Human tissue polypeptide aigen (TPA) ELISA Kit 人组织多肽抗原(TPA)试剂盒

HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibodyELISAKit 人血管紧张素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanIerleukin3,IL-3试剂盒人白介素3(IL-3)试剂盒规格：96T/48T

组织(lithium)酶连续循环反应比色法定量试剂盒20次

humanIerleukin27，IL-27ELISAKit人白介素27(IL-27)试剂盒规格：96T/48T

小鼠TH糖蛋白(THP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat carbonic anhydrase (CA) ELISA Kit 大鼠酶(CA)试剂盒

HumanInsulin,INSELISAKit 人胰岛素(INS)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanclusterOfdiffereiation,CDl4试剂盒人CD14分子(CDl4)试剂盒规格：96T/48T

组蛋白脱乙酰化酶2(HDAC2)活性比色法定量试剂盒20次

Humaheumatoidahritisassociatednuclearaigen,RANAELISAKit人抗类风湿关节核抗原(RANA)试剂盒规格：96T/48T

人孕受体试剂盒   人孕受体试剂盒   规格型号：96T/48T   人孕受体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人孕受体试剂盒、人孕受体试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人孕和adipoQ受体家族成员Ⅶ试剂盒   人孕和adipoQ受体家族成员Ⅶ试剂盒   规格型号：96T/48T   人孕和adipoQ受体家族成员Ⅶ试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人孕和adipoQ受体家族成员Ⅶ试剂盒、人孕和adipoQ受体家族成员Ⅶ 试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人孕激素试剂盒   人孕激素试剂盒   规格型号：96T/48T   人孕激素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人孕激素试剂盒、人孕激素试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人1试剂盒   人1试剂盒   规格型号：96T/48T   人1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人1试剂盒、人1 试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

HA重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

phospho-eIF4E(pSer209 0.5mgphospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 0酸化eIF-4E(Ser209)抗原

PVRL1重组人 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 Protein

HEXB Protein Human 重组人 Hexosaminidase B / HEXB 蛋白

CTSA Protein Human 重组人 Cathepsin A / CTSA 蛋白

CM-R032大鼠肠静脉内皮细胞C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纤维细胞)     LRRN3 Others Human 人 LRRN3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 杆状病毒-昆虫细胞裂解 小鼠原代肾小球系膜细胞 小鼠原代卵巢内膜细胞

大鼠前列腺微血管内皮原代细胞beta-Amyloid(1-16 0.5mgbeta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉样肽(1-16)(大鼠，小鼠)

ITGA8 & ITGB1 Protein Human 重组人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 蛋白

HPX重组小鼠 Hemopexin / HPX 蛋白 Protein

IL12B Protein Rat 重组大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白

NRG1重组人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 标签) Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。