详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
细胞属性:
方法简介
公司实验室分离的大鼠前列腺平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠前列腺平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠前列腺平滑肌原代细胞 | 组织来源 | 前列腺 |
英文名称 | Rat Prostate Smooth Muscle Cells | 货号 | YS-01X7464 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介:
大鼠前列腺平滑肌细胞分离自前列腺组织;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成对的实质性器宫,由腺组织和肌组织构成。前列腺如栗子,底朝上,与膀胱相贴,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面贴耻骨联合,后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过,扼守着尿道上口,所以,前列腺有问题时,排尿首先受影响。前列腺是机体非常少有的,具有内、外双重分泌功能的性分泌腺。作为外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是构成精液主要成分;作为内分泌腺,前列腺分泌的激素称为“前列腺素"。前列腺平滑肌细胞是前列腺的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。前列腺平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
操作步骤:
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
公司产品:
人抑瘤素M(OSM)ELISA 试剂盒
Human ansferrin receptor (TFR/CD71) ELISA Kit 人转铁蛋白受体(TFR/CD71)试剂盒
Humahymidinephosphorylase,TPELISAKit 人核苷0酸化酶(TP)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanIerleukin16,IL-16试剂盒人白介素16(IL-16)试剂盒规格:96T/48T
组织可溶性总蛋白制备试剂盒20次
HumanIestinalefoilfactor,ITFELISAKit人肠三叶因子(ITF)试剂盒规格:96T/48T
小鼠P21蛋白(P21)试剂盒 96T/48T
Rat glycogen phosphorylase isoenzyme II (GP-II) ELISA Kit 大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)试剂盒
HumanFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 人游离睾酮(F-TESTO)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumancoagulationfactorⅩⅢ,FⅩⅢ试剂盒人ⅩⅢ(FⅩⅢ)试剂盒规格:96T/48T
组蛋白转甲基酶活性试剂盒(H3-K9)20次
HumaeninELISAKit人肾素(Renin)试剂盒规格:96T/48T
人孕激素/孕(PROG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人超敏游离雌三醇(uE3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人去甲上腺素(NA)ELISAKIT ELISA. 96T/48T
人前列腺素F(PGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
SERPIND1重组小鼠 SerpinD1 / HCII 蛋白 Protein
CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/转化生长因子β受体抗原 0.5mgCD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/转化生长因子β受体抗原
SRC重组人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 标签) Protein
HAGH Protein Human 重组人 HAGH / GLO2 / Glyoxalase II 蛋白
IL7 Protein Rat 重组大鼠 IL7 / interleukin 7 蛋白
CM-R003大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞AHSG Others Human 人 Fetuin-A / AHSG / FETUA 人细胞裂解液 小鼠神经干细胞(EGFP标记) 人肺癌细胞 NG108-15 [ 108CC15 ](小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞) 小鼠原代肾脏巨噬细胞 大鼠原代角膜上皮细胞
大鼠前列腺平滑肌原代细胞CGB(Chromogranin B 0.5mgCGB(Chromogranin B) 嗜铬粒素B抗原
ISG15 Protein Human 重组人 ISG15 / G1P2 蛋白 (mature form)
FGFR4重组小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 Protein
IL34 Protein Mouse 重组小鼠 IL-34 蛋白
CROT重组人 CROT 蛋白 (474 Leu/Val, His 标签) Protein