详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
细胞属性:
方法简介
公司实验室分离的大鼠脐静脉平滑肌采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠脐静脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠脐静脉平滑肌原代细胞 | 组织来源 | 脐带组织 |
英文名称 | Rat Umbilical Vein Smooth Muscle Cells | 货号 | YS-01X7671 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介:
大鼠脐静脉平滑肌细胞分离自脐带组织;它是脐静脉的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构,脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘,脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。血管平滑肌是许多重大血管疾病的细胞基础;血管平滑肌细胞的异常增加的生长潜力在血管疾病发生过程中起决定作用。由于脐带是分娩过程中的废弃物,同时从脐带中分离人脐静脉平滑肌细胞方法相对成熟,使得体外培养的脐静脉平滑肌细胞作为研究血管的模型细胞。脐静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
操作步骤:
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
公司产品:
人孕酮受体(PGR)ELISA 试剂盒
Human tumor vascular endothelial growth factor (TAF) ELISA Kit 人肿瘤血管生长因子(TAF)试剂盒
HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit 人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humaninsulin-likegrowthfactors2,IGF-2试剂盒人胰岛素样生长因子2(IGF-2)试剂盒规格:96T/48T
组织己糖激酶(HEXOKINASE)酶偶联反应比色法定量试剂盒20次
HumanLDL-ICELISAKit人低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)试剂盒规格:96T/48T
豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat angiotensin conveing enzyme (ACE) ELISA Kit 大鼠血管紧张素转化酶(ACE)试剂盒
Humanglomerularbasememembraneaibogy,GBMELISAKit 人抗肾小球基底膜抗体(GBM)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCyclophosphamide,CTX试剂盒人环0酰胺(CTX)试剂盒规格:96T/48T
组织HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR扩增试剂盒20次
HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人脊髓灰质病毒IgG(PV-IgG)试剂盒规格:96T/48T
山羊促生长激素释放激素试剂盒 山羊促生长激素释放激素试剂盒 规格型号:96T/48T 山羊促生长激素释放激素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:山羊促生长激素释放激素试剂盒、山羊促生长激素释放激素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
双花扁豆凝集素试剂盒 双花扁豆凝集素试剂盒 规格型号:96T/48T 双花扁豆凝集素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:双花扁豆凝集素试剂盒、双花扁豆凝集素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
兔子生长激素释放多肽试剂盒 兔子生长激素释放多肽试剂盒 规格型号:96T/48T 兔子生长激素释放多肽试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:兔子生长激素释放多肽试剂盒、兔子生长激素释放多肽eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
豚鼠白三烯D4试剂盒 豚鼠白三烯D4试剂盒 规格型号:96T/48T 豚鼠白三烯D4试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:豚鼠白三烯D4试剂盒、豚鼠白三烯D4eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
NP重组甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) Protein
PEDF (pigment epithelium-derived factor 0.5mgPEDF (pigment epithelium-derived factor) 色素上皮源性因子(多肽抗原)
CPB2重组人 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白 Protein
HCST Protein Human 重组人 HCST / DAP10 蛋白 (Fc 标签)
CD200 Protein Human 重组人 CD200 / OX-2 蛋白 (His & Fc 标签)
CLMP Others Mouse 小鼠 ASAM / ACAM 人细胞裂解液 KYSE70细胞,人食管鳞癌 神经胶质瘤细胞,SHG-44细胞 猪肾传代细胞;IBRS-2 EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人细胞裂解液 SK-MES-1(人肺鳞癌细胞) 小鼠原代视网膜色素上皮细胞 兔原代巩膜成纤维细胞
大鼠脐静脉平滑肌原代细胞FK506结合蛋白样蛋白(FKBPL)重组蛋白 Recombinant FK506 Binding Protein Like Protein (FKBPL)
IL9 Protein Human 重组人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白
TFPI2重组小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白 Protein
ERBB2 Protein Rat 重组大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白
FKBP7重组人 PPIase / FKBP7 蛋白 Protein