大鼠浦肯野原代细胞

大鼠浦肯野原代细胞

大鼠浦肯野细胞分离自小脑皮质组织；小脑的表面被覆着一层灰质，叫小脑皮质，小脑皮质分为3层，从表及里分别为分子层、浦肯野细胞层和颗粒细胞层。皮质里含有星状细胞、篮状细胞、浦肯野细胞、高尔基细胞和颗粒细胞等5种神经元。浦肯野细胞发出的轴突组成小脑皮质的传出纤维，终止于小脑白质内的神经核。浦肯野细胞（Purkinje cell）是从小脑皮质发出的能够传出冲动的神经元。人的小脑皮质约有1500万个浦肯野细胞。浦肯野细胞还广泛分布于心室。显著的电生理特点是传导性强，传导速度快，可达4000mm/s。属快反应自律型细胞，具有舒张期自动除极化的性能，因而有自律性，但自律性强度明显低于窦房结P细胞。这类细胞常常平行排列，细胞内电阻低，只有心室细胞的1/3。小脑：浦肯野细胞是小脑皮质中最大的神经元，细胞体呈梨形，顶端发出2~3条粗大的主树突，向外伸入分子层。主树突沿途分支繁茂，形如展开的、扁薄的扇形，铺展在与小脑叶片长轴垂直的平面上。树突分支上有大量的树突棘，与传入纤维构成广泛的突触联系，接受传入小脑的全部信息。轴突由细胞底部（与主树突相对方向）发出，细长，离开胞体不远便形成有髓神经纤维，向内经颗粒层离开皮质进入白质，组成小脑皮质的传出纤维，终止于小脑内部的神经核团。一个浦肯野细胞的轴突约形成500个终末膨大，约与小脑深部核团的35个神经元形成突触。心脏浦肯野细胞常常平行排列，几个细胞互相以浆膜连接排成一个小束，小束外包绕着基底膜。细胞内含肌原纤维很少，胞浆区内充满糖原颗粒、线粒体和肌浆网，细胞内电阻低，只有心室细胞的1/3。浦肯野细胞内无横管系统，但膜电容比收缩细胞大，可能是由于其闰盘结构广泛而复杂，提供了较大的表面积的缘故。浦肯野细胞闰盘的主要成分是缝隙连接，粒着膜占的比例很少，这些可能是构成浦肯野细胞传导快的形态学基础。

产品名称：大鼠浦肯野细胞

组织来源：小脑组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含脂质浓缩液、BSA、Monothioglycerol、Transferrin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 神经元细胞样

传代特性 不增殖；不传代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠浦肯野采用消化法结合神经元专用培养基、化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶

质量检测

公司实验室分离的大鼠浦肯野经Neph3免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

人粘蛋白3(MUC3)ELISA 试剂盒

Human tumor necrosis factor soluble receptor I (TNFsR- I) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)试剂盒

HumanHistoneDeacetylase,HDELISAKit 人组织蛋白去乙酰化酶(HD)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAP试剂盒人免疫抑制酸性蛋白(IAP)试剂盒规格：96T/48T

组织基质金属蛋白酶(MMP-2)活性比色法定量试剂盒20次

Humanleukemiainhibitoryfactorreceptor，LIFRELISAKit人白血病抑制因子受体(LIFR)试剂盒规格：96T/48T

豚鼠表皮生长因子(EGF)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human cytovillin / Ezrin protein (cytovillin/ezrin) ELISA Kit 人细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(cytovillin/ezrin)试剂盒

HumanSS-A/RoaibodyELISAKit 人抗SS-A/Ro抗体试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCyclin-dependekinase4,CDK-4试剂盒人周期素依赖性激酶4(CDK-4)试剂盒规格：96T/48T

组织GRK5激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

Humanpolymyositis-sclerosisaibody,PM-Scl/PM-1ELISAKit人抗多发性肌硬皮病抗体(PM-Scl/PM-1)试剂盒规格：96T/48T

人脂多糖试剂盒   人脂多糖试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂多糖试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人脂多糖试剂盒、人脂多糖试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人脂多糖结合蛋白试剂盒   人脂多糖结合蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂多糖结合蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人脂多糖结合蛋白试剂盒、人脂多糖结合蛋白试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人脂蛋白脂酶试剂盒   人脂蛋白脂酶试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂蛋白脂酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人脂蛋白脂酶试剂盒、人脂蛋白脂酶试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人脂蛋脂酶A2试剂盒   人脂蛋脂酶A2试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂蛋脂酶A2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人脂蛋脂酶A2试剂盒、人脂蛋脂酶A2 试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

FCGRT & B2M重组食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13 0.5mgMMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基质金属蛋白酶13抗原

CLIC4重组人 CLIC4 蛋白 Protein

JAM3 Protein Human 重组人 JAM3 / JAM-C 蛋白

SEMA5A Protein Mouse 重组小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白

CL187/CCL187细胞，人大肠癌细胞 人黑色素瘤细胞,M14细胞 人多发性骨髓瘤细胞;RPMI-8226 [RPMI8826]  LRRTM4 Others Human 人 LRRTM4 人细胞裂解液   293T, SV40转化的人胚肾上皮细胞系 小鼠原B细胞 小鼠原代室管膜细胞 人原代脂肪血管基质细胞

大鼠浦肯野原代细胞Melamine/BSA 三聚胺偶联牛血清白蛋白 1mgMelamine/BSA 三聚胺偶联牛血清白蛋白

ING4 Protein Human 重组人 ING4 蛋白

EPHA4重组食蟹猴 EphA4 蛋白 Protein

EPO Protein Mouse 重组小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白

FES重组人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 标签) Protein