大鼠破骨原代细胞

大鼠破骨原代细胞

大鼠破骨细胞分离自骨组织和骨髓；破骨细胞是骨组织中的多核巨细胞，位于骨组织表面的浅凹处。目前一般认为破骨细胞是分离自骨骼外的造血系统，其前体可能属于造血干细胞的前单核细胞。破骨细胞的主要功能是维持骨吸收和骨形成的相对平衡，若失去这种平衡则发生病理性变化。因此多数学者从破骨细胞着手研究破骨细胞的结构、功能探讨骨吸收，形成相互平衡的机制。但破骨细胞是一种终末分化细胞，属于不增殖细胞群，不能增殖和传代，只能进行原代培养且存活时间较短。

产品名称：大鼠破骨细胞

组织来源：骨髓

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 多核、巨细胞

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠破骨采用机械分离法/密度梯度离心法和骨髓单核细胞诱导法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠破骨经TRAP染色检测，纯度可达30%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA 试剂盒

Human tumor necrosis factor beta (TNF- beta) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子β(TNF-β)试剂盒

HumanMethylaseELISAKit 人甲基化酶(Methylase)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGH试剂盒人免疫反应性生长激素(irGH)试剂盒规格：96T/48T

组织基质金属蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明胶法比色定量试剂盒20次

HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)试剂盒规格：96T/48T

豚鼠白介素6(IL-6)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 大鼠血管紧张素原(aGT)试剂盒

HumanAi-proteinase3aibodyIgG,PR3Ab-IgGELISAKit 人抗蛋白酶3抗体IgG(PR3Ab-IgG)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumancyclophilinA,CyPA试剂盒人嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)试剂盒规格：96T/48T

组织GSK3激酶总活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)试剂盒规格：96T/48T

人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人载脂蛋白B100(apo-B100)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人白血病抑制因子受体(LIFR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

A(IgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

ACVR2A重组小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

Beta-Amyloid(1-28 0.5mgBeta-Amyloid(1-28) β淀粉样肽1-28(多肽蛋白)

NRG1重组人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 标签) Protein

ITGAX & ITGB2 Protein Human 重组人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白

FZD4 Protein Rat 重组大鼠 Frizzled-4 / FZD4 蛋白 (Fc 标签)

CL-0465WERI-Rb-1(人视网膜神经胶质瘤细胞)  Y1(Y-1) (小鼠上腺皮质细胞)     PON3 Others Human 人 PON3 / Paraoxonase 3 (50 Ser/Asn) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   CREG1 Others Mouse 小鼠原代输卵管平滑肌细胞 大鼠原代脊髓星形胶质细胞

大鼠破骨原代细胞GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha 0.5mgGSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)

ING5 Protein Human 重组人 ING5 蛋白 (GST 标签)

IL18R1重组大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 标签) Protein

EREG Protein Mouse 重组小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 标签)

CAMKV重组人 CAMKV 蛋白 (His & GST 标签) Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。