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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
实验室分离的大鼠脾脏单核采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的大鼠脾脏单核经CD14免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠脾脏单核原代细胞 | 组织来源 | 脾脏 |
英文名称 | Rat Spleen Monocyte Cells | 货号 | YS-01X8249 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
大鼠脾脏单核细胞分离自脾脏组织；脾脏是机体最大的免疫器官，占全身淋巴组织总量的25%，含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞，是机体细胞免疫和体液免疫的中心。位于左季肋区后外方肋弓深处，与9－11肋相对，长轴与第10肋一致。膈面与膈肌和左肋膈窦相邻，前方有胃，后方与左肾、左肾上腺毗邻，下端与结肠脾沟相邻，地柔软的网状内皮细胞器官。单核细胞（monocytes）是体积最大的白细胞。其细胞核常偏位，呈多形性，如卵圆形、肾形(a)、马蹄形(b)、不规则形（c）等，常有折叠感(c)；染色质呈疏松网状，着色较浅。胞质较多，嗜碱性，但因含大量细小的嗜天青颗粒而染成灰蓝色，颗粒含过氧化物酶。单核细胞是血液中最大的血细胞。目前认为它是巨噬细胞的前身，具有明显的变形运动，能吞噬、清除受伤、衰老的细胞及其碎片。单核细胞还参与免疫反应，在吞噬抗原后将所携带的抗原决定簇转交给淋巴细胞，诱导淋巴细胞的特异性免性反应。单核细胞也是对付细胞内致病细菌和寄生虫的主要细胞防卫系统，还具有识别和杀伤肿瘤细胞的能力。淋巴细胞则为具有特异性免疫功能的细胞。T淋巴细胞主要参与细胞免疫反应而B淋巴细胞参与体液免疫反应。
培养信息：
培养基：含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：半贴壁半悬浮
细胞形态：巨噬细胞样
传代特性：不传代，不增殖，存活1-2周
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠脾脏单核细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
人真胰岛素(TI)ELISA 试剂盒
Human tumor necrosis factor alpha conveing enzyme (TACE) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)试剂盒
Humanproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGH试剂盒人免疫反应性生长激素(irGH)试剂盒规格：96T/48T
组织基质金属蛋白酶(MMP-14)活性荧光定量试剂盒20次(10样本)
HumanleukocyteaigenA，HLA-AELISAKit人类白细胞抗原A(HLA-A)试剂盒规格：96T/48T
豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)试剂盒
humansinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit 人抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCyclin-dependekinase7,CDK-7试剂盒人周期素依赖性激酶7(CDK-7)试剂盒规格：96T/48T
组织GSK3α激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)试剂盒规格：96T/48T
人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)试剂盒 96T/48T
人脂蛋白α(Lp-α)试剂盒 96T/48T
人脂蛋白a（Lp-a）试剂盒 96T/48T
人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)试剂盒 96T/48T
HPX重组小鼠 Hemopexin / HPX 蛋白 Protein
beta-Amyloid(1-16 0.5mgbeta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉样肽(1-16)(大鼠，小鼠)
NRG1重组人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 标签) Protein
ITGA8 & ITGB1 Protein Human 重组人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
IL12B Protein Rat 重组大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白
CL-0449SW 780(人膀胱移行细胞癌) RWPE1(人前列腺上皮细胞) NEK3 Others Mouse 小鼠 NEK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人细胞裂解液 A431细胞，表皮癌细胞系 人T淋巴细胞系,H9细胞 tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1D3 CM-H136人牙周膜成纤维细胞100mL 小鼠原代输卵管上皮细胞 小鼠原代肌腱成纤维细胞
大鼠脾脏单核原代细胞血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM1)重组蛋白 Recombinant Platelet/Endothelial Cell Adhesion Molecule (PECAM1)
INHBB Protein Human 重组人 Inhibin beta B / INHBB / Activin B 蛋白
S100A2重组人 S100A2 蛋白 Protein
GLYCOPROTEIN Protein Sudan ebolavirus 重组苏丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白
HA重组甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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