大鼠皮层神经元原代细胞

大鼠皮层神经元原代细胞

大鼠皮层神经元细胞分离自脑皮层组织；皮层神经元细胞是构成中枢神经系统结构和功能的基本单位。神经元是具有长突触(轴突)的细胞，它由细胞体和细胞突起构成。在长的轴突上套有一层鞘，组成神经纤维，它的末端的细小分支叫做神经末梢。细胞体位于脑、脊髓和神经节中，细胞突起可延伸至全身各器官和组织中。细胞体是细胞含核的部分，其形状大小有很大差别，直径约4-120微米。核大而圆，位于细胞中央，染色质少，核仁明显。细胞质内有斑块状的核外染色质，还有许多神经元纤维。细胞突起是由细胞体延伸出来的细长部分，又可分为树突和轴突。每个神经元可以有一或多个树突，可以接受刺激并将兴奋传入细胞体。每个神经元只有一个轴突，可以把兴奋从胞体传送到另一个神经元或其他组织，如肌肉或腺体。皮质神经元是大脑皮质的主要组成细胞之一，是大脑进行功能活动调节的基本单位，参与动物多种中枢神经系统疾病的病理过程。通过形态学观察显示神经元从贴壁、伸出突起开始；突起逐渐增多，而后突起进一步增多并逐渐成网，同时细胞胞体增大，周边光晕明显。10-12d细胞最为丰满，随后神经元开始裂解，突起逐渐减少，细胞已退化变性，轮廓模糊，光晕消失，细胞变形。

产品名称：大鼠皮层神经元细胞

组织来源：脑组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 神经元细胞样

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠皮层神经元采用消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠皮层神经元经β-Tubulin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

人脂蛋白相关0脂酶A2(Lp-PL-A2)试剂盒

Human tumor markers (CA724) ELISA Kit 人肿瘤标志物(CA724)试剂盒

HumanCaspase3,Casp-3ELISAKit 人胱天蛋白酶3(Casp-3)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanImmuneRNA,Irna试剂盒人免疫核糖核酸(Irna)试剂盒规格：96T/48T

组织基质金属蛋白酶(MMP-1)活性比色法定量试剂盒20次

HumanLeukoieneB4，LT-B4ELISAKit人白三烯B4(LTB4)试剂盒规格：96T/48T

豚鼠白介素12(IL-12/P70)试剂盒 ，英文名： IL-12/P70 ELISA Kit

Human nonmethylated oligonucleotide (NON) ELISA Kit 人非甲基化寡核苷酸(NON)试剂盒

RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 兔子表皮生长因子(EGF)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(HumanBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M

细菌印度墨负性染色试剂盒50次

RabbitE-SelectinELISAKit兔子E选择素(E-Selectin/CD62E)试剂盒规格：96T/48T

人脂蛋白a试剂盒   人脂蛋白a试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂蛋白a试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人脂蛋白a试剂盒、人脂蛋白a 试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人脂阿拉伯甘露聚糖试剂盒   人脂阿拉伯甘露聚糖试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂阿拉伯甘露聚糖试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人脂阿拉伯甘露聚糖试剂盒、人脂阿拉伯甘露聚糖试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人正常T细胞表达和分泌因子试剂盒   人正常T细胞表达和分泌因子试剂盒   规格型号：96T/48T   人正常T细胞表达和分泌因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人正常T细胞表达和分泌因子试剂盒、人正常T细胞表达和分泌因子试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

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CGB(Chromogranin B 0.5mgCGB(Chromogranin B) 嗜铬粒素B抗原

CROT重组人 CROT 蛋白 (474 Leu/Val, His 标签) Protein

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IL34 Protein Mouse 重组小鼠 IL-34 蛋白

CL-0421RAG(小鼠肾腺癌细胞)  ZR-75-30(人癌细胞)     NOTCH1 Others Mouse 小鼠 Notch-1 / NOTCH1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   PKM Others Mouse 小鼠 PKM2 / OIP3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 小鼠原代输尿管平滑肌细胞 兔原代肾上皮细胞

大鼠皮层神经元原代细胞CK17(Cytokeratin 17 0.5mgCK17(Cytokeratin 17) 细胞角蛋白17抗原

CDKN2D Protein Human 重组人 CDKN2D / p19ink4d 蛋白 (GST 标签)

IgG1重组小鼠 IgG1-Fc 蛋白 (102 Cys/Ser) Protein

FGF1 Protein Mouse 重组小鼠 / 大鼠 aFGF / FGF1 蛋白

SERPINB4重组人 SerpinB4 蛋白 Protein