大鼠膀胱移行上皮原代细胞

大鼠膀胱移行上皮原代细胞

大鼠膀胱上皮细胞分离自膀胱组织；膀胱是一个储尿器官，在哺乳类动物，它是由平滑肌组成的一个囊形结构，位于骨盆内，其后端开口与尿道相通。膀胱与尿道的交界处有括约肌，可以控制尿液的排出。膀胱壁由三层组织组成，由内向外为黏膜层、肌层和外膜。肌层由平滑肌纤维构成，称为逼尿肌，逼尿肌收缩，可使膀胱内压升高，压迫尿液由尿道排出。在膀胱与尿道交界处有较厚的环形肌，形成尿道内括约肌。在括约肌收缩能关闭尿道内口，防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分为三层：即浆膜层（蜂窝脂肪组织）、肌肉层（逼尿肌、膀胱三角区肌）和黏膜层（极薄的一层移行上皮组织）。其主要作用有：①组成过滤屏障内壁的重要部分；②在炎症和致血栓物质的刺激合成必要的生物活性分子；③受损后影响系膜细胞和上皮细胞，进而影响肾脏病变。

产品名称：大鼠膀胱移行上皮细胞

组织来源：膀胱组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠膀胱移行上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠膀胱移行上皮经Cytokeratin-AE1/AE3免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

人组织型纤维溶酶激活物(t-PA)试剂盒

Rat apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 大鼠载脂蛋白E(Apo-E)试剂盒

Humanai-toxoplasmaIgMaibody,ai-toxIgMELISAKit 人抗弓形体IgM抗体(ai-toxIgM)试剂盒 进口分装

HumanHeatShockProtein90,HSP-90试剂盒人热休克蛋白90(HSP-90)试剂盒

组织副氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR扩增试剂盒20次

HumanMaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit人基质金属蛋白酶13(MMP-13)试剂盒

小鼠2(VD2)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat bone specific alkaline phosphatase B (ALP-B) ELISA Kit 大鼠骨特异性碱性0酸酶B(ALP-B)试剂盒

Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit 人蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenJapaneseEncephalitisIgG,JEIgG试剂盒鸡流行性乙型脑抗体IgG(JEIgG)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞INSULIN蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)试剂盒规格：96T/48T

猪C反应蛋白(CRP)试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪Bcl-2相关X蛋白(BAX)试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)试剂盒     试剂盒   组装/原装

HA重组甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PR (Progestogerone receptor 0.5mgPR (Progestogerone receptor) 孕激素受体(抗原)

ABL1重组人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 标签) Protein

INS Protein Human 重组人 Insulin / INS 蛋白

DLL4 Protein Human 重组人 DLL4 蛋白 (Fc 标签)

CL-0361HPAC(人胰腺腺泡上皮癌)  人主动脉内皮细胞 (HAEC)BRL 3A, 大鼠肝正常细胞 Rattus  GBC-SD细胞，胆囊癌细胞 人细胞系,WI-38细胞 小鼠小胶质细胞;BV2  大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6  SEMA6A Others 小鼠原代卫星胶质细胞 大鼠原代鼻腔粘膜上皮细胞

大鼠膀胱移行上皮原代细胞FRA1/FOSL1 peptide FRA-1多肽蛋白 1mgFRA1/FOSL1 peptide FRA-1多肽蛋白

ADIPOQ Protein Human 重组人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白

CD59重组大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白  Protein

JAM2 Protein Mouse 重组小鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白

EPOR & CD131重组人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白 Protein